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Lösung mit einem Tropfen Wasser und fügt eine Oese voll des Ge- 
misches sofort zu den in einem Tropfen Wasser vertheilten, lebenden 
Bacterien oder zu fixirtem Materiale. Man kann auch eine Spur der 
spirituösen Lösung direct zu den im Wasser liegenden Bacterien 
bringen. Die Lösung färbt das Cytoplasma nicht; die Tröpfehen 
werden intensiv gelb gefärbt. Zweitens ist Sudan III (von Grübler 
u. Co., Leipzig; Amidoazobenzolazo-ß-naphtol) in einer Lösung von 
0,1 in 20ccm 9öproc. Alkohol in gleicher Weise zu verwenden. Es 
färbt Cytoplasma kaum, die Tröpfchen stark roth. Alkanninlösung 
(Alkannawurzelrinde 1 Tb. mit 5 Th. 50proc. Alkohol ausgezogen 
und mit einer Spur Essigsäure angesäuert) färbt die Tröpfchen eben- 
falls sehr gut, scheidet aber beim Färben störende Tröpfchen aus, 
während die Ausscheidung der beiden vorhergenannten Farbstoffe 
krystallinisch ist. Oyanin färbt das Cytoplasma zu stark. 
Andere Farbstoffe, welche ich bezüglich ihrer Wirkung auf B. 
tumescens untersuchte, dringen entweder nicht oder schwierig (bei 
meiner Methode) in die Stäbchen ein, so z. B. Sprittblau, oder färben 
Fett und Plasma kaum (so z. B. Eosin, Säurefuchsin, Cocein) oder 
alles gleichmässig schwach, wie z. B. Neutralroth. De&lafield’sches 
Hämatoxylin färbt die relativ dicke Bacteriemembran sehr intensiv 
und dringt sehr schwierig ein. 
Die Methylenblausudanmethode und die Methylen- 
blaugelbmethode zur Nachweisung der Fette. Da das Methylen- 
blau den Protoplasten intensiv, das Fett nicht färbt, Sudan sich aber 
umgekehrt verhält, so eignen sich die beiden Farbstoffe zusammen 
sehr gut zur Nachweisung des Bacterienfettes. Die Doppelfärbung 
macht zugleich noch manche andere Verhältnisse deutlich sichtbar. 
Man bringt zur Ausführung der Methylenblausudanfärbung ein Tröpf- 
chen Formal auf den Objectträger, setzt eine Oese voll des Bacterien- 
materials hinzu, vermischt sorgfältig und lässt das Formal fünf Minuten 
einwirken. Hierauf fügt man einen Tropfen der Methylenblaulösung 
hinzu, rührt um und lässt 10 Minuten stehen; dann setzt man eine 
Oese voll einer frisch bereiteten Mischung von einem Tropfen Sudan- 
lösung und einem Tropfen Wasser hinzu. Es färbt sich jetzt das 
Cytoplasma, ev. auch der Zellkern blau, das Fett roth. Im Uebrigen 
beobachtet man bei B. tumescens ofi eine schwache Rothfärbung der 
Membran und in fettfreien Zellen oft etwas heller erscheinende, un 
gefärbte Zellsaftvacuolen. Da sich die Sporenmembran auch hellroth 
färbt, könnten ungeübte Beobachter die gefärbten Sporen ev. mit 
Fetttropfen verwechseln. Statt Sudan kann man Gelb anwenden. 
