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Mein Material stammte aus zwei verschiedenen Quellen. Die 
ersten Objecte waren Mitte April in Hakone auf einer Excursion ge- 
sammelt und die zweiten Mitte Mai in Omiya bei Tokyo. Der mässig 
grosse Stock mit zahlreichen, eben aus der Erde hervortretenden 
Knospen wurde stets sammt den ganzen Mycorhizenmassen vorsichtig 
ausgegraben und im Laboratorium unter Glasglocke weiter eultivirt. 
Die Pflanze lebte monatelang ganz gesund in diesem Zustand fort 
und blühte reichlich. In dieser Weise war es mir möglich, alle 
wichtigen Vorgänge genau zu controliren. Die Knospen der ersten 
Reihe entfalteten sich fast gleichzeitig Ende April, worauf ich am 
3. Mai die künstliche Bestäubung vorgenommen habe. Nachher 
wurden täglich die Samenanlagen aus einigen Fruchtknoten lebend 
untersucht, um den Zustand des Embryosackinneren festzustellen. 
Erst am 13. Mai wurde das erste Zeichen von Befruchtung kenntlich, 
weshalb ich während einiger der folgenden Tage zahlreiche Frucht- 
knoten in die Fixirungsflüssigkeiten einlegte.e Die zweite Reihe 
wurde künstlich bestäubt am 1. Juni und in diesem Falle wurden 
die ersten Zeichen der Befruchtung schon am 7. Juni beobachtet. 
Die Untersuchung des frischen Materials bei dieser Pflanze ist 
nicht allzu leicht, aber man kann nach einiger Uebung den Bau des 
Embryosacks, der im Wesentlichen mit demjenigen der von Stras- 
burger beschriebenen M. hypopitys übereinstimmt!), klar erkennen. 
Die Samenanlagen erhielten sich 2—3 Stunden lang ganz gesund 
in Brunnenwasser. Ich konnte jedoch keine lebhafte Strömung in 
den Plasmasträngen, die den Embryosackkern mit dem Eiapparat, 
Embryosackwand u. s. w. verbinden, wahrnehmen. Die Synergiden 
werden beim Eintritt des Pollenschlauches undurchsichtig und stark 
lichtbrechend. Trotz der Anwendung stärkerer Immersionssysteme 
unter günstigen Beleuchtungsverhältnissen, wurde die Erkennung des 
männlichen Kernes, der mit dem Embryosackkern copulirt, dadurch 
sehr erschwert, dass sich seine optische Beschaffenheit kaum vom um- 
gebenden Cytoplasma unterscheidet und es wollte mir anfangs über- 
haupt nicht gelingen. Aber die Erfahrung bei dem eingehenden 
Studium mit den fixirten Präparaten leitete mich schliesslich dahin, 
den Vorgang der Befruchtung auch am lebenden Material unzwei- 
deutig wahrzunehmen (Fig. 11 u. 12). 
. Die Fixirung geschah theils in der Flemming’schen stärkeren 
Lösung, theils in Sublimatessig. Die in Paraffin eingebetteten Stücke 
der Fruchtknoten wurden meist in 15 dicke Schnitte zerlegt, da die 
1) Vgl, Strasburger, Das botanische Practicum, 8. Aufl. pag. 554, 
