REVUE BIBLIOGRAPHIQUE. 291 
alors connues. Malheureusement tous les essais de culture sur des 
pommes de terres échouèrent avec d’autres Bactéries. Mais le principe 
des cultures dans un milieu artificiel solide était trouvé. Il était naturel 
de chercher des milieux différents de la pomme de terre employée dans 
les premiers essais. 
Après de très nombreuses tentatives, M. Koch parvint à former un 
milieu de culture très avantageux en mélant au liquide nutritif une cer- 
taine quantité de gélatine. Pour cela, on prend de la gélatine à laquelle 
on ajoute de l’eau distillée et qu’on dissout au bain-marie. On y verse le 
liquide approprié à l’organisme que l’on a en vue, et les liquides ainsi 
mélangés sont amenés, par la concentration, à être dans le mélange 
définitif dans un rapport connu. C’est ainsi que, pour avoir à la fin une 
proportion de 1 1/2 à 3 pour 100 de gélatine, ce qui est la proportion 
la plus avantageuse, il faut préparer une dissolution de gélatine à 5 pour 
100 ; le premier liquide de l'extrait de viande, par exemple, doit renfer- 
mer une quantité d'extrait double de celui qui devra être contenu dans le 
second mélange, autrement dit 2 pour 100, si l’on veut avoir une propor- 
tion de 1 pour 100. Le mélange étant fait, on neutralise la gélatine, qui 
est toujours légèrement acide, par un peu de sel alcalin, un phosphate 
ou carbonate de soude, par exemple. On fait bouillir et l’on filtre. On verse 
le tout dans un vase préalablement stérilisé par ébullition prolongée, sous 
pression, à 150 degrés. On ferme avec du coton flambé, et l’on fait bouillir 
de nouveau, pendant très peu de temps cette fois, et à 100 degrés. Les 
spores que le liquide peut renfermer ne sont, à la vérité, pas détruites, 
mais une ébullition prolongée et à plus haute température empêcherait 
la gélatine refroidie de « faire prise ». On laisse refroidir, et l’on donne 
le temps aux spores de germer pendant deux à trois jours. Il s’est formé, 
à cette époque, de petits points blanchâtres qui grossiraient beaucoup si 
l’on abandonnait la gélatine à elle-même, et qui rendraient toute la masse 
absolument fluide et trouble. Ces points blanchâtres sont des colonies de 
Bactéries : une courte ébullition les détruit aussitôt, sans qu’ils aient pu, 
comme ils l’auraient fait certainement dans un liquide, se répandre dans 
tous les sens et perdre la culture. Cette opération, répétée aussi souvent 
qu’on le croit nécessaire, à deux jours d'intervalle chaque fois, finit par 
donner une gélatine absolument stérilisée et qui pourra désormais se con- 
server indéfiniment. 
Avant d’ensemencer la gélatine avec l’organisme à étudier, on la chauffe 
au bain-marie à 30 degrés pour la rendre fluide; on l’ensemence alors 
avec toutes les précautions de propreté parfaite usitées en pareil cas, et 
on la verse, soit sur des plaques de verre, soit dans des verres de montre, 
suivant la manière dont on veut l’observer. Le tout est placé dans un 
espace clos maintenu humide, à une température qui ne doit pas de beau- 
