14 TRYPANOSOMES ET TRYPANOSOMIASES 



inéthylique (2 à 3 minutes); on laisse sécher ou on enflamme Talcool 

 resté sur la lame. 



Fixation aux vapeurs osmiques. — Quand, au lieu de sang, on a 

 affaire à d'autres liquides qui peuvent renfermer des parasites : 

 sérosités sanguinolentes retirées des œdèmes, liquide céphalo- 

 rachidien, liquides des milieux de cultures, suc d'organes dilacérés 

 ou écrasés, puis étalés, — ou encore à du sang anémique, ou simple- 

 ment du sang dilué d'eau physiologique ou d'eau cilratée, la fixation 

 après dessication n'est jamais aussi parfaite que pour le sang pur; 

 souvent les trypan. de ces divers liquides apparaissent vacuolaires. 



Dans ces cas, il est recommandé de fixer les frottis, faits de pré- 

 férence sur lamelles, avant dessiccation, par les vapeurs osmiques. 

 Minchin conseille d'employer une solution d'acide osmique à 4 p. 100 

 à laquelle on ajoute une goutte d'acide acétique glacial par 20 gouttes. 

 Mais on peut utiliser des solutions moins concentrées, par exemple 

 à 1 p. 100. 



L'introduction de ce mode de fixation bien connu à l'étude des 

 trypan.. est due à Gray et Tulloch (1905) ', qui l'ont employé pour les 

 frottis faits avec les contenus intestinaux de tsétsés. C'est le pro- 

 cédé de choix pour les flagellés de l'intestin des invertébrés, que l'on 

 veut ensuite colorer par une méthode dérivée de celle de Roma- 

 nowsky. 



Ce procédé réussit également bien pour le sang et, en particulier, 

 la forme des trypan. est mieux conservée que dans les frottis fixés 

 après dessiccation. Nous estimons que son emploi mérite d'être 

 particulièrement recommandé et d'être généralisé. Quand le frottis 

 est pauvre en albuminoïde, il y a avantage à lui ajouter une petite 

 goutte de sérum d'un animal quelconque -. 



Il faut avoir soin de laisser agir l'acide osmique très peu de temps, 

 en moyenne de 10 à 15 secondes, 20 secondes au maximum. 



En général, on laisse le frottis se dessécher; la dessiccation com- 

 mence d'ailleurs pendant que les vapeurs osmiques agissent. 



Il est recommandé de faire suivre cette fixation par une seconde à 

 l'alcool absolu. 



On peut, dans le cas des fixations aux vapeurs osmiques, éviter la 

 dessiccation et faire passer alors les lamelles de liquide en liquide. 

 Cette manière de faire ne paraît pas comporter d'avantages particu- 

 liers; il est préférable alors de recourir à des liquides fixateurs 

 osmiques. 



Fixation des frottis humides. — Les cytologistes condamnent 

 souvent les fixations précédées ou suivies de dessiccation, ou au 



1. Gray et Tulloch, Roy. Soc, Report of Ihe Sleep. Sickn. Conim. (no VIII), 1905. 



2. Cette application de séruins frais a- été recommandée pour la première fois par 

 Leishman dans le traitement des coupes. 



