20 TRYPANOSOMES ET TRYPANOSOMIASES 



un mélange homogène; une coloration de 3 à 5 minutes suffit. On 

 termine par un lavage à l'eau courante, on sèche et on examine à 

 l'immersion. 



D'après Billet*, on rend les résultats de la méthode de Giemsa 

 plus constants en renforçant la solution, prête pour l'emploi, par 

 quelques gouttes de bleu carbonate. Il est préférable de placer le 

 bain colorant à 45-50°. 



« La méthode de Romanowsky, dit Minchîn, est incontestable- 

 ment la meilleure méthode pour étudier les caractères généraux des 

 trypanosomes, spécialement quand elle est combinée avec la fixa- 

 tion osmique. » Toutes -les parties chromatiques paraissent notable- 

 ment plus grosses qu'avec les méthodes cytologiques classiques. 

 Minchin en donne de très bons exemples en figurant des trypan. 

 fixés de la même façon et colorés les uns par l'Heidenhain (v. ci- 

 dessous), les autres par le Romanowsky. En poussant graduellement 

 la décoloration de ceux-ci, on a une tendance à se rapprocher de la 

 structure révélée chez ceux-là. Le Romanowsky conduit à certaines 

 illusions : comme flagelle et périplaste se colorent en rouge, on a 

 une tendance à les considérer comme de même origine que le noyau 

 qui se teint de la même façon. Or, la méthode de Twort (v. ci- 

 dessous) colore flagelle et périplaste en vert, alors que les deux 

 noyaux prennent une teinte rouge. 



Giemsa s'est attaché à remédier à certains de ces inconvénients 

 en traitant les préparations, maintenues constamment humides, 

 comme nous l'avons indiqué ci-dessus (v. page 15). Après le lavage à 

 l'eau courante, on colore de 1 à 12 heures avec la solution de Giemsa 

 étendue (1 goutte pour 1 à 2 ce. d'eau) en ayant soin de renouveler 

 le colorant après la première demi-heure. Giemsa recommande 

 vivement que l'eau distillée à employer pour cette dilution ne soit 

 pas acide. 



Après coloration, passage à l'eau distillée, puis dans les bains : 



a) Acétone 95 ce. -|- xylène 5 ce. 



b) Acétone 70 ce. -f- xylène 30 ce. 



c) Acétone 30 ce. -j- xylène 70 ce. 



On y laisse les frottis des temps variables suivant le degré de 

 différenciation désiré. On termine par un lavage au xylène et on 

 monte à l'huile de cèdre. 



On remarquera l'utilisation de l'acétone au lieu de l'alcool comme 

 déshydratant. 



Giemsa a donné ultérieurement ^ des figures montrant les excel- 



1. Billet, C. P. Soc. Biologie, t. LXI, J906, p. 753. 



2. Giemsa, Centralbl. f. Bakler., I, Origin., t. LIV, 1910, p. 489. 



