26 TRYPANOSOMES ET TRYPANOSOMIASES 



anaérobies sur le fond duquel est placé du coton bien imbibé de 

 bichlorure de mercure. 



Manceaux (/. c), pour éviter la dessiccation et les poussières, 

 conseille de placer chaque tube dans un autre d'un diamètre immé- 

 diatement supérieur, placé l'ouverture en bas. L'ouverture du 

 premier tube est appliquée sur le fond du plus grand (cette région 

 est flambée) à l'aide d'un tampon de coton qui ferme l'ouverture de 

 celui-ci. 



Dans l'eau de condensation des tubes de gélose-sang, les trypano- 

 somes se développent, soit à la température du laboratoire, soit à 

 l'étuve à 34-37°. On réalise donc ainsi de véritables cultures pures. 

 L'introduction accidentelle de bactéries a généralement pour effet 

 de faire mourir rapidement les trypanosomes. Nous avons pourtant 

 gardé des Tr. Lewisi vivants et virulents plus de 15 jours dans un 

 tube où avaient poussé d'abondants microbes. 



Gomme pour les bactéries, les cultures de trypan. peuvent s'ense- 

 mencer de tube en tube et être ainsi conservées des années sans 

 repasser par l'organisme vivant. 



Lorsque les trypan. sont habitués depuis un certain temps au 

 milieu de culture, ils poussent non seulement dans l'eau de conden- 

 sation, mais encore à la surface de la gélose, où ils donnent de 

 petites colonies blanches, humides, se distinguant facilement à 

 l'œil nu. 



Novy a cultivé sur le môme milieu des flagellés trouvés dans 

 l'intestin de moustiques. Depuis les travaux de Ch. Nicolle, le 

 milieu gélose-sang est devenu aussi le milieu de choix pour la 

 culture des Leishmania. 



Enfin, il convient de signaler le procédé très simple, qui a réussi 

 à Mijajima et à tous ceux qui l'ont suivi dans cette voie, pour 

 obtenir la culture du trypan. des bovidés : il suffît d'ajouter au 

 bouillon ordinaire de 20 à 50 p. 100 de son volume du sang du 

 bovidé porteur de parasites. 



§ 4. — Inoculations. 



Rien de bien particulier à dire à ce sujet. On emploie le sang 

 défibriné, ou simplement le sang pur, ou encore la sérosité sangui- 

 nolente ou le liquide céphalo-rachidien contenant les trypanosomes, 

 et on l'inocule à la seringue ou à la pipette aux divers animaux sur 

 lesquels on veut expérimenter. — S'il s'agit de trypan. pathogènes, 

 l'inoculation peut être faite, à peu près indifféremment quant au 

 résultat final, sous la peau (ou même à la surface à vif d'une écor- 

 chure), dans le péritoine ou dans la veine. 



Seul, le temps d'incubation diffère avec le mode d'inoculation; par 



