TECHNIQUE 19 



Leishman; le point de départ est le même : préparation d'une poudre 

 (Giemsa se sert comme bleu du bleu Azur II). Il utilise la solubilité 

 relativement grande de ces matières colorantes dans la glycérine, 

 et il prépare la solution suivante : 



Poudre « Azur II-Eosine ». 3 gr. ) . . , - i - . ,, • . 

 . ,, A o ^ uien dessèches a 1 exsicateur. 



Azur II gr. 8 ^ 



Glycérine 250 gr. 



On opère à 60"; on ajoute ensuite, toujours à 60' : alcool méthylique, 

 250 gr. On abandonne 24 heures à la température de la chambre et on 

 filtre. Durant ces diverses manipulations, il convient d'éviter avec soin 

 toute trace d'humidité. 



La solution de Giemsa existe toute préparée dans le commerce; 

 elle peut être employée par un des deux procédés qui suivent : 



1" Procédé de coloration lente. — Dans une petite éprouvette 

 graduée, on met 15 ce. d'eau distillée, on ajoute 15 gouttes de la 

 solution de Giemsa, on mélange et on verse dans la boîte spéciale à 

 colorations. Les frottis de sang convenablement fixés sont laissés 

 dans le bain colorant pendant 6 à 12 heures; après quoi on lave à 

 grande eau et on sèche. 



2° Procédé de coloration rapide. — Le bain colorant est préparé 

 avec une quantité double de la solution de Giemsa (30 gouttes 

 environ pour 15 ce. d'eau distillée^). Au bout de 15 à 20 minutes, la 

 coloration est en général suffisante. On lave à grande eau et on 

 sèche. 



Si la coloration obtenue par l'un ou l'autre de ces procédés est 

 insuffisante, on peut faire passer la préparation dans un nouveau 

 bain colorant. 



L'examen à l'aide des objectifs à immersion est fait en déposant 

 directement sur la préparation une goutte d'huile de cèdre que l'on 

 enlève ensuite, comme nous l'avons déjà indiqué. 



Pour obtenir une coloration très rapide. Giemsa - conseille 

 d'employer un colorant composé d'un mélange à parties égales de 

 solution colorante de Giemsa et d'alcool méthylique pur; on le garde 

 dans un flacon compte-gouttes. 



La préparation, placée frottis en haut dans une boîte de Pétri, est 

 recouverte entièrement du mélange colorant (10 à 15 gouttes); on 

 laisse agir une demi-minute, puis on verse dans la boîte de Pétri la 

 quantité d'eau distillée nécessaire pour recouvrir entièrement la 

 lame porte-objet (10 à 15 cm') ; on agite prudemment pour obtenir 



1. Il n'est pas possible d'indiquer plus exactement la quantité de solution à 

 employer parce que le pouvoir colorant des solutions de Giemsa est un peu variable. 



2. GiEMS.\, Munch. mediz. Woch., 1010, p. 2476. 



