TECHNIQUE 2") 



Manceaux* conseille avec raison de laisser la gélose se dégorger 

 24 heures dans l'eau, renouvelée une fois. Elle se débarrasse ainsi 

 dimpurelés qui gênent parfois la culture. 



Quand la gélose est refroidie à 53-55°, on lui incorpore une, deux 

 ou trois fois^ son volume de sang défibriné, pris tout à fait asepti- 

 (juement. de rat, de cobaye ou plus généralement de lapin. Puis les 

 tubes de culture sont inclinés à la manière ordinaire et on laisse 

 solidifier le milieu. Dès qu'il est bien pris, on redresse les tubes, 

 de façon îi avoir rapidement et en grande quantité de l'eau de 

 condensation au fond des tubes. C'est cette eau de conden- 

 sation qu'on ensemence avec une anse de liquide provenant ou 

 bien du sang d'un animal infecté, ou bien d'une culture précé- 

 dente. 



D'après Mathis ^ le milieu gélose-sang peut être chautïé. Il prépare 

 son milieu comme Novy-Mc Neal en ajoutant 1 partie de gélose 

 nutritive à 1 ou 2 parties de sang défibriné; mais ensuite il chauffe 

 le mélange à 75-80° ou à 100" (1 ou plusieurs fois), ou à 120° 

 (1/2 heure). Le milieu est solidifié en plan incliné et on* ensemence 

 l'eau de condensation. 



Dans ces conditions, le sang de nimporte quelle espèce animale 

 peut être employé (en particulier de bœuf et de cheval), qu'il soit 

 recueilli aseptiquement ou sans précautions aucunes; les milieux se 

 conservent longtemps de composition fixe, et ils sont débarrassés 

 des substances toxiques pour les trypanosomes que renferment les 

 sangs non chauffés. 



Avec ces milieux chauffés, Mathis a cultivé avec succès le Tr. 

 rotatorium des grenouilles (et, avec Léger, divers trypan. de 

 vertébrés à sang troid), le Tr. Lewisi et un trypan. de l'hirondelle 

 isolé par Sergent en Algérie. "Woodcock les recommande pour la 

 culture des trypan. d'oiseaux. 



Comme les tubes sont souvent conservés des mois, des précautions 

 sont prises pour éviter toute évaporation de l'eau de condensation. 

 Si les cultures sont faites à 20-25°, Me Neal et Novy ont d'abord 

 conseillé de les fermer à la cire; ils sont maintenant d'avis de leur 

 mettre des capuchons de caoutchouc très épais; ce dernier mode de 

 fermeture nous a également réussi. A 34-37°, les savants américains 

 groupent les tubes dans un grand exsiccateur ou un appareil pour 



1. L. Manceaux, Bull. Soc. Path. exot., t. IV, 1011, p. 280. 



2. Le Tr. Lewisi, d'après Me Neal et Novy, pousse dans des milieux avec 1 de sang 

 pour 5 et mémo 10 de gélose. Mais il préfère les milieux riches en sang; la propor- 

 lion optima parait être 2 de sang pour i de gélose. — Le Tr. Bracei ne pousse (jue 

 dans les milieux qui renferment au moins autant de sang que de gélose, pour le 

 mieux 2 à 3 de sang pour 1 de gélose. Et encore les cultures sont-elles fort difficiles 

 à obtenir (Voir le chapitre spécial). 



3. Mathis, C. R. Soc. de Biologie, t. LXI, 1006, p. 330; t. LXXI, 1911, p. 538. 



