162 TRYPANOSOMES ET TRYPANOSOMIASES 



et à la première période de la maladie du sommeil. Lorsque nous 

 étudierons celte dernière maladie, nous verrons que la recherche 

 des trypanosomes est souvent plus facile dans la lymphe extraite 

 des ganglions lymphatiques hypertrophiés que dans le sang. A la 

 deuxième période de la maladie du sommeil, c'est surtout dans le 

 liquide cérébro-spinal, obtenu par la ponction lombaire, qu'il faut 

 rechercher les trypanosomes. 



Le procédé des frottis épais de sang préconisé par R. Ross pour 

 la recherche des hématozoaires (voir p. 22) a été employé avec succès 

 par la mission allemande de la maladie du sommeil. Kleine et Fis- 

 cher recommandent la technique suivante '. On laisse tomber au 

 milieu d'une lame porte-objet plusieurs gouttes de sang qui sont 

 réunies et étalées rapidement au moyen d'une plume métallique ou 

 d'un couteau de manière à former une couche épaisse de la grandeur 

 d'un schilling. Quand le sang est complètement desséché, la pré- 

 paration est colorée, sans traitement préalable par l'eau pour 

 l'extraction de l'hémoglobine et sans fixation par l'alcool. La 

 solution colorante est préparée fraîchement en ajoutant à 8 ce. 

 deau distillée ce, 4 d'une solution d'éosine à 1 p. iOO et 6 ce. 

 d'une solution d'azur II à gr., 16 p. 100. Après 1 h. 1/2 de séjour 

 dans le bain colorant, les préparations sont lavées dans un vase 

 rempli d'eau ordinaire, séchées à l'air et examinées sans l'emploi 

 de lamelles couvre-objet. 



Lorsque l'examen direct du sang d'un homme ou d'un animal 

 présumé infecté ne permet pas de constater la présence des trypa- 

 nosomes, on peut employer un des procédés qui suivent pour la 

 recherche des parasites. 



1" On recueille, par ponction d'une veine, 10 ce. de sang dans un 

 tube contenant un peu d'eau physiologique citratée et on centrifuge 

 de 5 à 10 minutes, suivant la vitesse de rotation de l'appareil. Au 

 bout de ce temps, le liquide qui surnage est retiré et centrifugé; si 

 le culot est encore abondant et riche en hématies, on décante de 

 nouveau le sérum et on opère une troisième cenlrifugation; c'est 

 dans le culot qui s'est formé en dernier lieu que Ion recherche les 

 trypanosomes. 



On peut aussi faire une seule centrifugation d'une durée de 20 à 

 25 minutes; au-dessus du culot formé par les hématies, on observe 

 une mince couche blanchâtre due aux leucocytes, c'est dans cette 

 couche que se réunissent les trypanosomes; après avoir décanté la 

 plus grande partie du sérum, on arrive à l'aide dune pipette fine 

 à opérer des prises dans cette couche superficielle. 



2" L'emploi des animaux d'épreuve rend de grands services pour 



1. F.-K. Kleine et W. Fischer, Zeitschr. f. Hyg. a. Infektionskr., 1011, t. 70, p. 3. 



