Bemerkungen zur Technik der Sporozoenuntersuchungen. 155 



kann nun in dem aufgefangenen Verdauungssaft folgen. Mit einem 

 schwächten Objektiv (Zeiß AA) durchmustert man zunächst die freie 

 riüssigkeit auf das Vorhandensein von Gregarinen oder Cysten. Sodann 

 zerlegt man mit einem scharfen Skalpell oder mit Nadeln durch Zer- 

 zupfen den Darm in kleinere Stücke. Fallen dabei keine Schmarotzer 

 auf, so ist es ratsam, die Untersuchung des betreffenden Darmes auf- 

 zugeben und erst eine Reihe von Exemplaren zu durchsuchen, um fest- 

 zustellen, ob überhaupt an dem Fundort Parasiten vorhanden sind. 

 3) Untersuchung des frischen Materials, 



Hat man Gregarinen gefunden, so zerzupft man die Darmwand in 

 feinere Stücke und bedeckt das Präparat vorsichtig mit einem Deckglas, 

 nachdem man zuvor durch Wachsfüßchen, einen Glassplitter oder einen 

 anderen Fremdkörper verhindert hat, daß die Schmarotzer oder ihre 

 Cysten gequetscht werden. Ein Vaselinrand verhindert das Verdunsten 

 der für die Beobachtung besonders günstigen Verdauungsflüssigkeit, in 

 welcher die Gregarinen lange Zeit beweglich und am Leben bleiben. 

 Als Ersatz kann man physiologische Kochsalzlösung oder eine Eiweiß- 

 lösung (20 ccm Hühnereiweiß 4~ 1 g Kochsalz -f- 200 ccm Wasser) an- 

 wenden. Wasserzusatz zerstört die Parasiten schnell. 



Für die Beobachtung der intracellulären Entwickelungsstadien ist 

 Monocystis agilis aus den Samenblasen der Regenwürmer besonders ge- 

 eignet. Man nehme einen Regenwurm, dessen Geschlechtsgürtel kräftig 

 entwickelt ist, öffne ihn vom Rücken her und entferne die vordersten, 

 zugleich kleinsten männlichen Samenblasen i), quetsche sie leicht unter 

 dem Deckglas und beobachte die Ränder des Präparates. Findet man 

 nichts in den vordersten Blasen, oder sind diese zu klein oder gelblich 

 gefärbt, so nehme man einen zweiten Regenwurm. Die ersten Ent- 

 wickelungsstadien findet man nur in den jungen Regenwürmern, er- 

 wachsene Gregarinen und Cysten ausschließlich in älteren. 



Um ganz sicher die ersten intracellulären Stadien anzutreffen, muß 

 man die betreffenden Wirtstiere mit reifen, der Nahrung beigemischten 

 Sporen füttern. Nach 2 bis 3 Tagen sind die reifen Sporen aus dem 

 Verdauungssaft verschwunden und die Epithelzellen infiziert. 



Entwickelungsfähige Cysten gewinnt man, wie schon oben erwähnt 

 wurde, am leichtesten aus dem Kot. Man sammelt denselben in einem 

 Uhrschälchen mit Wasser und kann alsdann die Cysten häufig schon 

 mit bloßem Auge als kleine, runde, mattweiße Kugeln erkennen und mit 

 einer Staarnadel herausheben. Die Cysten müssen bis zur Reifung in 

 Süß- oder Meerwasser aufbewahrt werden, je nachdem das Wirtstier ein 

 Land- oder Meeresbewohner ist. Das Wasser muß täglich mindestens 

 zweimal gewechselt werden ; dabei sind die Cysten mit einem feinen 

 Pinsel von Pilzwucherungen zu befreien. Manche Cysten reifen besser 

 in feuchter Luft. 



4)FixierungundFärbung. 



Zur 'Fixierung dient Osmiumsäurelösung, Sublimat oder 

 Pikrinessigsäure (100 Teile konzentrierte Pikrinsäurelösung -f- 

 200 Teile destilliertes Wasser -f- 3 Teile Eisessig).- 



Man färbe mit Essigkarmin, Pikrokarmin oder Safraninlösung 

 (Lösung in gleichen Teilen Alkohol und Wasser, Entfärben mit Säure- 



1) Die männlichen Samenblasen liegen in der Höhe des 9. — 12. Bauchringes 

 xmd wölben sich beim Durchschneiden des Wurmes hier als ziemlich ansehnliche 

 gelblich-weiße Bläschen vor. 



