376 Konservierung und Fixierung. 



Objekts eine mehr oder minder große Zahl von Mischungsstufen ein- 

 schaltet, also z. B. das Objekt nicht direkt von Wasser in absoluten 

 Alkohol, sondern zuerst in 20-proz., dann in 50-proz., dann in 70-proz., 

 dann in 90-proz. und schließlich erst in absoluten Alkohol bringt. 

 Bei vielen Objekten genügen als Stufen 50-proz., 90-proz., absoluter 

 Alkohol. 



So wenig wie lebende dürfen abgetötete Protozoen der Austrock- 

 nung ausgesetzt werden ; die Präparate müssen stets feucht bleiben, 

 da sonst sehr entstellende Veränderungen eintreten. 



a) Einzelmethode. 



Hat man nur wenige Individuen von Protozoen zur Verfügung, 

 so muß man die Fixierung und Färbung auf dem Objektträger vor- 

 nehmen. Da kommen hauptsächlich zwei Methoden in Betracht: 



1) Behandlung unter dem Deckglas, 



2) Aufklebemethode. 



1. Behandlung unter dem Deckglas. 



In der üblichen Weise unter das Deckglas zur Beobachtung ge- 

 brachte Protozoen, welche womöglich durch Abschmelzen der Wachs- 

 füßchen etwas festgeklemmt sind, tötet man ab, indem man die Kon- 

 servierungsflüssigkeit von der einen Seite mit einer Pipette unter 

 das Deckglas treten läßt, während man zu gleicher Zeit von der 

 anderen Seite mit Hilfe von schmal zugeschnittenen (deckglasbreiten) 

 Streifen von Filtrierpapier die Kulturflüssigkeit absaugt. Ist das 

 Protozoon abgetötet und fixiert, so läßt man in derselben Weise mit 

 der Pipette zum Auswaschen, zum Härten, Färben, Differenzieren, 

 Aufhellen etc. von der einen Seite Flüssigkeit zutreten, während man 

 von der anderen Seite die vorausgegangene Flüssigkeit absaugt. 

 Jedesmal muß durch wiederholtes Verfahren die eine Flüssigkeit voll- 

 kommen verdrängt werden, ehe die nächste zugesetzt wird. Sehr 

 sorgfältig müssen mit dem absoluten Alkohol alle Spuren von Wasser 

 verdrängt werden, da die Diffusionsströme beim Zusatz von Nelkenöl 

 oder Xylol oft das ganze Objekt zerstören, wenn noch Spuren von 

 Wasser in ihm enthalten sind. Auch darf beim Zusatz von Kanada- 

 balsam, welcher am besten in Xylol gelöst verwendet wird, kein ab- 

 soluter Alkohol mehr im Objekt sein. 



Anwesenheit von Wasser beim Zusatz von reinem Nelkenöl oder 

 Xylol verrät sich durch milchweißen Schimmer des Objekts. Ein 

 solches ist oft noch zu retten, wenn man es schnell in absoluten Alko- 

 hol zurückbringt. 



2. Aufklebemethode. 



Viele Rhizopoden und andere freilebende Protozoen sind so 

 klebrig an der Oberfläche oder werden durch Zusatz der Konser- 

 vierungsflüssigkeiten vorübergehend so klebrig, daß sie leicht am Ob- 

 jektträger festgeklebt werden, wenn man einen Tropfen der Konser- 

 vierungsflüssigkeit von oben auf sie fallen läßt; am Deckglas kann 

 man dasselbe erreichen, wenn man es mit der Seite nach unten, auf 

 welche die Protozoen mit möglichst wenig Kulturflüssigkeit gebracht 

 worden sind, auf die Oberfläche einer Konservierungsflüssigkeit fallen 

 läßt. In vielen Fällen kann man auch Protozoen direkt an den Deck- 



