Enzyme. \:\, 



Es gelangen hierbei leicht losliche Polypeptide zur Anwendung, die 

 grofiere Men gen schwer loslicher und leicht kristallisierbarer Araino- 

 sauren enthalten. Die eingetretene Spaltung wircl an den ausgeschie- 

 denen Kristallen erkannt. Benutzt wird eine klare, 1015%, von 

 Hoffmann -La Roche (Basel) zu beziehende Lb'sung, die mit Natrium- 

 karbonat ganz schwach alkalisch gemacht ist. Sie wird mit der 

 Enzyrnlb'sung und etwas Toluol versetzt und in den Brutschrank ge- 

 bracht. Bei Gegenwart von peptolytischen Enzymen werden sich 

 Tyrosinkristalle bilden. Spater hat Abderhalden 1 ) eine 10%ige 

 Glycyl-1-tryptophanlosung benutzt, aus der peptolytische Enzyme 

 Tryptophan abspalten, welches mit Brom eine violette Farbenreaktion 

 gibt. Die Schnitte kornmen in die Losung, die mit Toluol iiber- 

 schichtet wird, werden nach 12 bis 48 Stunden herausgenommen , ab- 

 gespiilt und Bromdampfen ausgesetzt. In vielen Fallen zeigte die nun 

 eintretende Violettfarbung, die gut lokalisiert war, den Sitz der Enzyme 

 an (besonders werden die Gefafie gefarbt!). 



Fermi und Buscalioni 2 ) haben proteolytische Enzyme in Pha- 

 nerogamen und in einigen Mykorrhizen nachzuweisen gesucht, indem 

 sie die betreffenden Schnitte auf eine karbolsaurehaltige Gelatineplatte 

 brachten. Verfllissigung derselben wurde auf die Gegenwart proteo- 

 lytischer Enzyme gedeutet. 



Shibata 3 ) wahlte makrochemische Methoden. Die abgetrenuten Mykorrhizeu 

 warden mit destilliertem Wasser gewaschen, getrockuet, mit Glyzerin verrieben. 

 Der Glyzerinbrei blieb eine Woche in verschlossenem Glaskolben unter ofterem 

 Umriihren stehen, wurde dann durch Leinwand filtriert und ruit dem 1 3fachen 

 Volumeu destillierten Wassers versetzt. In diese mit 0.05 0.1% Salzsaure an- 

 gesauerte Flii^sigkeit wurden kleine Fibrinsttickchen gebracht. Die so bescbickten 

 Fliissigkeiten wurden auf 4 5 Stunden, auch langer, im Tliermostaten gehalten 

 und die Losung der Fibrinstiicke festgestellt. 



Die Proteasen des Zellsaftes konnen nach der Chromogramm- 

 Methode von Griiss nachgewiesen werden. Hierzu benutzt man ein 

 mit Albumose durchtranktes Filtrierpapier, ,,laugt nach der Kapillari- 

 sation die Peptone aus und bringt das restierende Eiweifi durch Far- 

 bung zum Vorschein". 



l ) E. Abderhalden, Notiz zum Nacliweis peptolytischer Fermente in Tier- 

 und Pflanzengeweben, Ztscbr. f. phys. Chem., 1910, LXVI, S. 137. 



-} C.Fermi u. L. Buscalioni, Die proteolytischen Enzyme im Pflanzen- 

 reiche, Centralbl. f. Bakter., 1899, V, 2. Abt. 



3 ) K. Shibata, Cytologische Studien iiber die endotrophen Mykorrhizen, 

 Jahrb f. wiss. Bot,, 1902, XXVII. S. 670. 



