Quantitative Bestimmung der vier Chloroplastenfarbstoffe. 23 



alkalische Fliissigkeit nochmals mil Ather durch, der dabei gewohnlich 



farblos bleibt. 



Die vereinigten atherischen Losungen werden mit Wasser gewaschen. 



dem wir etwas methylalkoholische Kalilauge zusetzen, uni noch Spuren 

 von Chlorophyllin und ofters kleine Mengen brauner saurer organischer 

 Substanz zu entfernen, und schlieBlich zweiinal niit reinem Wasser. Dann 

 wird im Helmkolben der Ather im Vakuum bei gewohnlicher Temperatur 

 auf wenige Kubikzentimeter abgedampft, der Riickstand fiir die Frak- 

 tionierung niit 80 ccm Petrolather in einen Scheidetrichter gebracht 

 und das Kolbchen mit etwas Ather nachgespiilt. 



Fiir die Trennung der gelben Pigmente dienen nacheinander Ent- 

 mischungen mit 100 ccm 85 prozentigem, mit 100 ccm 90 prozentigem und 

 zweimal mit je 50 ccm 92 prozentigem Holzgeist. Der letzte Auszug ist 

 meistens farblos; andernfalls wiederholen wir die Extraktion mit dem 

 92 prozentigen Methylalkohol. 



Die holzgeistigcn Ausziige sind frei von Carotin. Man vermischt den 

 ersten mit 130 ccm Ather und fiihrt den Farbstoff durch langsamen 

 Zusatz von Wasser in Ather iiber. Dann fiigen wir zu der stark gelben 

 atherischen Losung den zweiten methylalkoholischen Xanthophyllauszug 

 und weitere 100 ccm Ather, da mit der abgelassenen holzgeistigen Schicht 

 viel Ather weggenommen wird. Durch langsamen Zusatz von Wasser 

 wird die Entmischung bewirkt, und mit dem gleichen Ather sammelt 

 man das Xanthophyll noch aus den spateren Ausziigen unter Zusatz 

 von mehr Ather und Wasser. Die atherische Losung des Xanthophylls 

 und ebenso die petrolatherische des Carotins befreien wir durch zwei- 

 maliges W 7 aschen mit Wasser vom Holzgeist, lassen sie durch trockene 

 Filter in lOO-ccm-MeBkolben laufen und versetzen sie bis zur Klarung 

 mit einigen Tropfen absoluten Alkohols. Endlich fiillen wir mit Ather 

 bezw. Petrolather bis zur Marke auf. 



Die Vergleichslosungen. Die folgenden Angaben beziehen sich 

 auf die colorimetrische Bestimmung der Chlorophylle und der Carotinoide 

 in je 20 g griinen Blattern. Von den aufgestellten Normen wird man, 

 was Menge und Konzentration der Vergleichsstoffe betrifft, beim Ver- 



