Quantitative Bestimmung der vier Chloroplastenfarbstoffe. 19 



Ausfiihrung der Analyse. 



Fiir die genaue Bestimmung der griinen und gelben Pigmente sollen 

 zusammen 40 g Blatter extrahiert werden und eine weitere Probe der 

 namlichen Blatter ist zur Trockengewichtsbestimmung erforderlich, wo- 

 fiir die Blatter bis zur Gewichtskonstanz, d. i. 24 48 Stunden, im Va- 

 kuumexsiccator anfgestellt werden. Das Extrahieren geschieht ebenso, 

 wie es im Abschnitt A fur die kleinere Blattprobe beschrieben worden 

 ist, nur mit entsprechend mehr Losungsmittel. Die Vorextraktion mit 

 wasserhaltigem Aceton ist jetzt besonders wichtig, da die so zu besei- 

 tigenden Stoffe den guten Verlauf der Spaltung durch Alkali beeintrach- 

 tigen wiirden. Die Extraktion der Blatter muB quantitativ sein, auch 

 wenn nicht ihr Farbstoffgehalt, sondern das Verhaltnis der Komponenten 

 gesucht wird; der bei unvollstandigem Extrahieren zuriickbleibende 

 Anteil des Blattfarbstoffes ist namlich viel reicher an der Komponente b. 



Bei den Assimilationsversuchen standen wegen der Kleinraumigkeit 

 der Apparatur nur 10 20 g Blatter zur Verfugung fiir die Bestimmung 

 aller vier Komponenten; sie verlor freilich dabei an Genauigkeit. 



Nach der fberfuhrung des Farbstoffgemisches aus dem Aceton- 

 extrakt in Ather wird die Losung mit etwas Natriumsulfat getrocknet 

 und in einen 2OO-ccm-MeBkolben filtriert. Dann dient sie in Halften 

 fiir die Bestimmung der griinen und der gelben Komponenten. 



Trennung der Chlorophyllkomponenten. 100 ccm atherischer 

 Rohchlorophyllosung werden in einenKolben mit eingeschliffenem Helm 1 ) 

 gespiilt und mit 1 / 2 ccm 2 n-alkoholischer Salzsaure versetzt. Dadurch 

 wird das Chlorophyll in Phaophytin verwandelt und dieses wird von 

 uberschiissigem Chlorwasserstoff vor Allomerisation geschiitzt. \Yir 

 dampfen dann den Ather im Vakuum in der Kalte ab und schlieBHch 

 unter kraftigem Saugen mit der Pumpe noch kurze Zeit bei 60. 



Die Verseifung des Rohphaophytins laBt sich nur gut in konzentrierter 

 Pyridinlosung ausfiihren und zwar durch mehrere Minuten dauerndes 

 Kochen mit sehr viel hochkonzentriertem methylalkoholischem Kali 



R. Willstatter und A. Stoll, Untersuchungen iiber Chlorophyll, S. 310. 



