402 R- Willstatter und A. Stoll. 



Zur Ausfiihrung einer Peroxydasereaktion, zum Beispiel zum Nachweis 

 von Hydroperoxydspuren, muB man daher entweder in sauerstofffreiem 

 Medium (in einem von Sauerstoffspuren befreiten Stickstoffstrom) ar- 

 beiten oder, was aus praktischen Riicksichten vorzuziehen ist, in sauer- 

 stoffarmem Medium bei Gegenwart von Kohlensaure. Der Kohlensaure- 

 gehalt wird so gewahlt, daB die Peroxydasereaktion nicht unterdriickt, 

 daB aber die Wirkung der Alkalien ausgeschaltet wird. Wir haben dafiir 

 eine Stahlflasche mit 5 bis 10 Proz. Kohlendioxyd und 90 bis 95 Proz. 

 Linde-Stickstoff in Verwendung. 



Pyrogallollosungen mit oder ohne Zusatz von Erdalkalicarbonaten 

 oder von Peroxydase blieben bei tagelangem Durchleiten eines solchen Gas- 

 gemisches vollkommen farblos. Setzt man aber zu einer lo-ccm-Probe, 

 welche 25 mg Pyrogallol und Peroxydase (0,05 mg eines guten Praparates) 

 enthalt, eine kleine Menge, zum Beispiel 0,01 mg, Hydroperoxyd, so tritt 

 (also in einer Verdiinnung von I : I ooo ooo) beinahe augenblicklich eine gut 

 wahrnehmbare hellgelbe Farbung ein. Deutlicher wird das gebildete Pur- 

 purogallin beim Ausschiitteln mit wenig Ather. Umhier die Enzymwirkung 

 auf superoxydhaltigen Ather zu verhiiten, schaltet man die Peroxydase 

 durch Zusatz von i ccm verdiinnter Schwefelsaure aus. Durch Vergleich 

 der Schkhtenhohen der atherischen Losungen von gleicher Farbstarke 

 kann man auch im Reagensglas noch die kleinsten Mengen von Hydro- 

 peroxyd schatzen, indem man mit einer Probe von bekanntem Gehalt 

 einen Parallel versuch vornimmt. Die zu untersuchenden Fliissigkeiten 

 werden zuerst durch den sauerstoffarmen Gasstrom von Luft befreit, ehe 

 man sie mit 25 mg Pyrogallol in I ccm Wasser versetzt ; das Durchleiten 

 wird beim Zufiigen der Enzymlosung oder von Hydroperoxyd fortgesetzt. 



Um zu entscheiden, ob eine beobachtete Purpurogallinreaktion durch 

 Hydroperoxyd oder andere geloste Peroxyde hervorgerufen ist, kann eine 

 Probe mit Katalase, die nur das einfachste Peroxyd zersetzt, behandelt 

 und abermals gepriift werden. 



Versuche mit Chlorophyll ohne Enzym. 



Die kolloiden Losungen waren nach den Angaben von Abschnitt VI, C 

 mit einem Zusatz von l / 10 Mol Magnesiumcarbonat bereitet, der die 



