296 METHODES GENERALES 



beaucoup plus parluile que celle que peut donner l'ablation des organes 

 et leur immersion pure et simple dans le liquide fixateur. Nous devons 

 aussi dire un mot de la fixation des animaux marins. 



Fixation par injection. — On trouvera dans Fouvrage de Mann ' la 

 description complète de celte méthode. Les principaux avantages sont 

 la rapidité de la lixation (toutes les cellules sont tuées en 50 secondes), 

 la lixation parfaite des organes les plus délicats, l'uniformité complète 

 de la fixation dans toute l'épaisseur des organes, la conservation de la 

 forme de tous les organes creux. 



L'appareil à injection pourra être un simple entonnoir de un ou 

 deux litres muni d'un long tube de caoutchouc. On emploie comme fixa- 

 teur le Bouin ou le Mann, chauffés à 38\ Ou commence par insensibi- 

 liser l'animal par le gaz d'éclairage qui dilate les vaisseaux et relarde 

 la coagulation du sang. On lave d'abord les vaisseaux en y faisant passer 

 de la solution physiologique, puis on injecte le fixateur. 



Méthode rationnelle de Rabenthaler. — Nous ne pouvons donner ici qu'un 

 aperçu de celte mélliode. Les cylologistes désireux de l'expérimenter 

 pourront trouver des détails très complets dans les publications de l'au- 

 teur 2. 



Rubenthaler trouve que l'immersion pure et simple de l'objet à fixer 

 dans le fixateur est un procédé brutal, dont l'action est assez violente 

 pour produire de nombreux artilices sans être a^sez puissante pour 

 effectuer une fixation instantanée. Son procédé a pour but d'atténuer 

 la réaction cellaluire, au moment du contact avec le fixateur. On y 

 arrive, d'une part, en produisant l'anesthésie des cellules, d'autre part 

 en graduant, par des dilutions successives, l'action du liquide fixateur. 

 Toutes les opérations sont pratiquées à la tempérnture .du corps de 

 l'animal au^iuel est emprunté l'organe à fixer : pour les ^Mammifères, 

 on doit donc opérer à l'éluve à 37' ou 38''. 



1. Anesthésie des cellules. — L'objet, très petit, est placé dans cent fois 

 son volume d'un liquide isotonique, variable avec sa nature (sérum 

 sanguin pour les muscles, liquide céphalo-rachidien pour le cerveau, 

 liquide amniotique pour les embryons, sève ou sucs de plantes, etc.). On 

 a préparé, d'autre part, une solution de chlorhydrate de cocaïne à 1 p. 100 

 dans le même liquide. L'anesthésie est produite peu à peu, en rem- 

 plaçant par tiers le liquide isotonique par la solution de cocaïne, avec des 

 intervalles de 10 minutes. 



2. Fixation progressive. — Opérée avec trois dilutions du fixateur avec 

 un quart, un demi, trois quarts d'eau. Ces trois dilutions doivent de 

 même remplacer par tiers le liquide anesthésique, avec des intervalles 

 de 10 minutes. On laisse ensuite le temps voulu dans le fixateur pur, à 

 froid ou à chaud. 



L'anesthésie demande 30 minutes et la fixation progressive 2 heures. 



Fixation des animaux marins. — Celle fixation exige des 

 précaulions parliciilières, l\ cause de la teneur élevée de ces orga- 

 nismes en substances salines; leurs liquides intérieurs doivent en 

 effet être isotoniques avec Feau de mer. Il faut donc éviter Temploi 



1. Mann, Plujsioloyical histolofj)/, p. 111-146. 



2. Rubentlialcr, Méthode générale de lixation ayant pour but de restreindre les 

 artefacts. Ztschr. f. uùss. Mikr.. XXIV, p. 133-13^, 1907. 



