378 MÉTHODES GÉNÉRALES 



3° Colorer dans la solution criiématoxyline pendant trente 

 minutes à vingt-quatre heures. 



On accélère beaucoup la coloration dans l'étuve à 37" ^ La pré- 

 paration doit prendre une coloration noire encre de Chine; 



A'^ Laver rapidement à Teau distillée ; 



5" Différencier dans l'alun de fer. 11 faut prendre un liquide 

 différent de celui qui sert à mordancer. La concentration peut 

 être la même ou plus faible (1 p. 100), s'il y a intérêt à ralentir 

 le processus pour le suivre plus exactement -. En effet, il est 

 indispensable de retirer les coupes de temps en temps, pour con- 

 trôler la différenciation. On les lave rapidement à l'eau et on les 

 examine avec un grossissement approprié. 



C'est dans ce cas qu'un objectif à immersion à l'eau peut rendre des 

 services. Pour les objectifs à sec forts, il est nécessaire de déposer une 

 lamelle à la surface de la préparation. Pour retirer cette lamelle, sans 

 endommager les coupes, il suffit de plonger la lame dans un tube 

 Borrel plein d'eau : la lamelle se délaclie d'elle-même. 



11 faut prendre soin de ne pas répandre de l'eau ou de l'alun de fer 

 sur la platine du microscope; pour cela, il faut essuyer soigneusement 

 la face inférieure de la lame ou, mieux encore, recouvrir la platine 

 d'une plaque de verre ou d'une boîte de Pétri. Bien entendu, cet 

 examen ne doit pas être pratiqué avec le cliariot, dont il faut enlever 

 la partie amovible. 



6" Après différenciation, laver soigneusement à l'eau, colorer si 

 on le juge utile par un colorant plasmatique (voir p. 397 colo- 

 rants acides), puis déshydrater et monter au baume. 



La différenciation peut varier dans de très larges limites; on la 

 pousse plus ou moins loin, suivant les parties qu'on veut mettre 

 en évidence. C'est là à la fois l'avantage et Fécueil de la méthode 

 de Heidenhain; elle permet au travailleur exercé de différencier 

 les plus fins détails cylologiques, mais elle expose le débutant à de 

 graves erreurs d'interprétation. En effet, non seulement le résultat 

 obtenu varie, suivant la durée de la coloration et de la différencia- 

 tion, mais encore il ne faut pas prendre tous les corpuscules sidé- 

 rophiles pour des inclusions nucléaires ou cytoplasmiques, ni 

 tirer des conclusions erronées d'une différenciation incomplète ou 



1. Gurwitscli inordance et colore à chaud (étuve à 40"), puis différencie à la 

 tempéi'ature ordinaire. On arrive ainsi à avoir en dix minutes une bonne colo- 

 ration. Ztschr. f. wiss. Mikr., XVIII, p. 291, 1902. 



2. On peut différencier par immersion dans le tube Borrel ou simplement en 

 mettant sur les coupes, lavées et égouttées, une grosse goutte d'alun de fer. 

 On installe sur le microscope et on surveille la marche de la différenciation. 



