386 MÉTHODES GÉNÉRALES 



Azur de méthylène. — Ce corps s'emploie sous forme de chlor- 

 hydrate; il est devenu un des coloranls ctjtologiques les jjIus 

 importants de la technique moderne. 



Son histoire ost des plus curieuses : longtemps méconnu, puis 

 désigné sous des noms divers et confondu avec d'autres corps, il a été 

 d'abord employé empiriquement dans la méthode de Romanovsky et, 

 comme toujours dans ces conditions, donnait des résultats assez irré- 

 guliers. Aujourd'hui, grâce aux travaux de Bernthsen, Unna, Noclit, 

 Michaelis, Giemsa et Pappenheim, la question est très simplifiée et on 

 colore à coup sûr avec l'azur de méthylène. 



Je crois que l'étude de ce corps doit être présentée ici, au moins dans 

 ses grandes lignes, car il est, avec le violet de méthylène, le colorant 

 le plus employé, dans les laboratoires où on se borne aux recherches 

 d'hématologie. L'importance de ce corps n'est donc pas moins grande 

 pour le médecin européen ou colonial que pour l'histologiste de profes- 

 sion. Je pense même que, dans le domaine médical, les colorants à base 

 d'azur de métl;iylène peuvent remplacer tous les autres. La connais- 

 sance des propriétés de ce corps ost donc indispensable. 



L'histoire de l'azur de méthylène commence en 1891. A cette époque, 

 Romanovsky ' découvre fortuitement qu'un mélange d'une solution de 

 bleu de méthylène avec une solution d'éosine permet de colorer en 

 violet carminé le noyau des parasites du paludisme. Ce noyau n'avait pu 

 jus(]ue-là être mis en évidence par aucun réactif. Malheureusement, 

 cette coloration spécifique, dont Romanovsky avait saisi toute l'impor- 

 tance, était très difficile à obtenir. Un léger excès de l'un ou l'autre 

 liquide l'empêchait de se produire : les proportions à employer dille- 

 raient avec les diverses marques de bleu et, malgré toutes les précau- 

 tions, il y avait des cas où la réaction ne réussissait pas. Romanovsky 

 remarqua pourtant que les solutions anciennes de bleu de méthylène 

 étaient celles qui donnaient les meilleurs résultats. 



La môme année, Unna - découvre aussi, par hasard, la coloration 

 métachromati([ue des granulations des labrocytes, en employant une 

 solution de bleu de méthylène alcalinisée et ancienne. 11 arrive à 

 reproduire à volonté cette coloration avec son bleu polychrome, qui est 

 encore actuellement un de nos meilleurs colorants directs. Ce bleu 

 polychrome n'est autre chose qu'une solution de bleu de niétliylène, 

 fortement alcalinisée par le carbonate de potassium et transformée en 

 un liquide violacé, dont nous étudierons plus loin la composition. 



C'est à Nocht 3 que nous devons la première tentative d'explication 

 de la coloration de la chromaline des Protozoaires, par la méthode d.e 

 Romanovsky. H pensa que cette coloration devait être due à quelque 

 impureté du bleu de méthylène, puisqu'elle ne réussit qu'avec des solu- 

 tions anciennes. Il remarqua que le bleu polychrome de Unna, après 

 neutralisation, produit très bien cette coloration, lorsqu'il est associé à 

 de réosine et ù du bleu de méthylène pur, non altéré. Finalement, il 



1. Romanovsk}^ Zur Frage der Parasitologie und der Thérapie der Malaria. 

 Sl-Pctersbourg med. Woch., VIII, p. 297-307, 1801. 



2. Ztschr. f. iviss. Mikr., VII, p. 447, 1891. 



3. Nocht, Zur Farbung der Malariaparasitcn. (Jeniralblatt f. Bakt., XXIV, 

 p. 839-817, 1898, et XXV, p. 764, 1899. 



