COLORATIONS PAR LES COULEURS D'ANILINE 387 



montra que, dans le bleu polychrome et dans les solutions mûries de 

 bleu de méthylène, il s'est formé un nouveau corps, qu'il nomma rouge 

 du bleu de méthylène, sans se prononcer sur sa nature. Ce corps peut être 

 extrait en agitant la solution de bleu de méthylène avec du chloro- 

 forme : ce dernier se colore en rouge et abandonne, par évaporation, un 

 corps qui, associé au bleu de méthylène et à Téosine, produit à coup 

 sur la coloration de Romanovsky. Donc, pour réussir la méthode de 

 Romanovsky, il est nécessaire d'employer une solution de bleu de méthy- 

 lène, renfermant du rouge du bleu de méthylène. 



Nous étudierons plus loin, en traitant des colorants neutres, la nature 

 de la réaction de Romanovsky. Pour le moment, nous devons chercher à 

 savoir ce qu'est le rouge du bleu de méthylène ' découvert par Nocht. En 

 réalité, on discute encore sur la véritable nature de ce corps. Il 

 semble pourtant résulter des recherches de Giemsa, de Mac Neal et de 

 Pappenheim, ({ue c'est un mélange d'azur de méthylène et de violet de 

 méthylène. Au contraire, pour Michaelis 2, ce serait de l'azur de méthy- 

 lène : ce qui fait l'erreur de Michaelis, comme Ta montré Pappenheim, 

 c'est qu'il attribue à l'azur de méthylène, contenu dans le bleu poly- 

 chrome, la propriété de colorer métachroraatiquement les granulations 

 des labrocytes. Or Pappenheim a démontré que l'azur de méthylène pur 

 ne donne pas celte coloration mélachromatique rougo, mais colore les 

 granulations en bleu. Il y a donc, dans le bleu polychrome de Unna et 

 dans les préparations analogues, trois corps en présence : du bleu de 

 méthylène non altéré, du violet de méthylène et de l'azur de méthylène. 



L'azur de mélhylène n'est donc pas autre chose qu'un produit 

 de Foxydaliou du bleu de méthylène en solution alcaline. On 

 l'obtient rapidement en traitant, à froid ou à chaud, le bleu de 

 méthylène par la jiotasse, la soude, la lilhine, le borate de 

 sodium, etc. Dans les vieilles solutions de bleu de méthylène, il 

 se forme spontanément, sous rinfluence de petites quantités 

 d'alcali qui proviennent du verre. 



La propriété essentielle de l'azur de méthylène, celle qui lui 

 donne une si grande importance dans la technique moderne, c'est 

 qu'il produit une coloration spécifique de la chromatine et en 

 général des substances dites azurophiles. Cette coloration spéci- 

 fique ne peut se produire qu'en présence d'une couleur acide, par- 

 ticulièrement de l'éosine. Il faut bien savoir pourtant que l'éosine 

 n'agit pas ici comme colorant, mais comme agent chimique et pro- 

 bablement comme mordant, car on peut la remplacer par d'autres 

 corps, tels que la résorcine, la pyrocatéchine, rhydroquinone, etc. 

 Non seulement la coloration de la chromatine est la plus intense 



1. Ne pas le confondre avec le rouge de méthylène qui ne joue aucun rôle 

 dans la réaction et qui est un composé bien défini. 



2. Michaelis, Das Methylenblau und seine Zersetzungsprodukte. Centrabl . f. 

 Bakt., Orig., XXIX, p. 763-769, 1905. 



