408 MÉTHODES GÉNÉRALES 



goulte d'iiiiile de cèdre et une lamelle, alin de ne pas risquer de 

 faire immersion avec les objeclifs à courle dislance focale. Après 

 examen, plonger la lame dans le loluène : la lamelle se détache 

 d'elle-même. 



Précautions à prendre pour préparer le Giemsa dilué. 



La solution de Giemsa poui^^la coloration de Romanovsky (Giemsa's 

 Lôsung fur Romano\vskyfârbung- de Griibier) est ainsi constituée : 



Azur II éosine 3 gr. 



Azur II 0,8 — 



Glycérine de Merck . 125 — 



Alcool méthylique de Kahlbaum 375 — 



Bien entendu, il ne faut pas la préparer soi-même, mais Tacheter 

 toute faite. Nous avons exposé (p. 389) la nature de l'azur II; Tazur II — éo- 

 sine est réosinate d'azur, qui agit comme colorant neutre et qui est 

 doué de la métachromasie neutrophilo spéciliciue pour les corps azuro- 

 pliiles (p. 403). Nous savons aussi (p. 390) que, dans les flacons un peu 

 anciens de solution de Giemsa, il y a toujours un peu de violet de 

 méthylène. Naturellement le liquide renferme aussi de l'éosinate de 

 bleu de méthylène et un excès de colorants basiques (bleu de mélhy- 

 lène et azur de méthylène), calculé de manièie à retarder la précipita- 

 tion de l'éosinate d'azur, au moment de la dilution, sans toutefois 

 influencer la coloration. 



La g-lycérine a pour but de donner des solutions plus concentrées en 

 matière colorante que l'alcool méthylique seul ne pourrait le supporter 

 et d'obvier à l'extrême volatilité de cet alcool (qui bout à 67°). Primitive- 

 ment ' la teneur' en glycérine était de 50 p. 100, mais, depuis 1907-, 

 elle a été abaissée à 25 p. 100, sans que la puissance colorante et la 

 faculté de conservation du liquide aient été intluencées. 



En opérant la dilution, il faut éviter tout ce qui peut favoriser la 

 précipitation de l'éosinate d'azur. 



1° L'eau distillée ne doit pas être acide : il est même préfé- 

 rable qu'elle soit légèrement alcaline. Les moindres traces d'un 

 acide organi(|ue ou minéral et même l'anhydride carbonique nui- 

 sent à la coloration. Cette sensibihté est telle que le papier de 

 tournesol est impuissant à déceler les traces d'acide suffisantes 

 pour altérer les composants basiques du colorant. 11 faut employer, 

 comme réactif indicateur '^ la solution alcoolique d'hématoxy- 



1. Giemsa, Eine Vereinfachung und Vervollkommung meincr Methylenazur- 

 Methylenblau-Eosin Farbemethode. Centralbl. f. Bakt, Orig., XXXVII, p. 308, 1904 



2. Giemsa, Beitrag zur Farbung der Spirochate pallida in Ausstrichpraparaten 

 Deutsche med. ^yocll., n" 17, 1907. 



3. Ces détails sont empruntés à Giemsa. Deutsche med. Woch., n" 12, 1910. 



