478 METHODES SPÉCIALES 



On recherche, dans les cultures en hoîtes de Pétri, les parties 

 visihles à Tœil nu, formant une frange délicate de 2 à 3 mm. de 

 large et renfermant heaucoup d'Amibes en division. On découpe 

 ces portions de gélose, de façon à avoir des morceaux de 1 cm. 

 à 1 cm. 5 de diamètre, qu'on dépose dans de larges cellules rondes 

 collées sur lames (fig. 139). Ces cellules doivent être très grandes, 

 car il faut qu'elles puissent admettre une lamelle qui doit reposer 

 sur la surface de la gélose, sans toucher les bords de la cellule. 

 Au bout d'une demi-heure aune heure de contact, presque toutes 

 les Amibes se sont collées à la lamelle. On introduit alors, avec 

 précaution, le liquide fixateur dans la cellule, de manière à ce 

 qu'il ne touche pas la lamelle et mouille seulement la base du 

 bloc de gélose. Il pénètre alors peu à peu par diffusion et finit par 

 atteindre la couche d'Amibes; celles-ci sont beaucoup mieux fixées 

 que par action directe. 



Von Wasielewski et Hirschfeld n'emploient que le sublimé 

 alcoolique et l'acide osmique à 2 p. 100 : le premier fixe mieux les 

 noyaux, le second différencie mieux l'endoplasme et l'ectoplasme 

 et conserve les pseudopodes. Je crois qu'on pourrait utiliser aussi 

 avec avantage le Bouin et le Duboscq-Brasil. Quoi qu'il en soit, 

 on laisse agir le sublimé pendant une heure au plus; on arrête son 

 action dès qu'au microscope les noyaux sont devenus bien appa- 

 rents. On lave deux heures à l'alcool iodé, on rince à l'alcool et 

 c'est seulement alors qu'on peut détacher la lamelle de la gélose. 

 A ce moment, on peut laver la préparation sous un filet d'eau, 

 qui entraîne les Bactéries et laisse les Amibes plus adhérentes. 

 On colore par l'hématoxyline ferrique de Heidenhain. 



Vacide osmique ne doit agir que pendant cinq minutes 

 environ. Le bloc de gélose et la lamelle sont ensuite portés dans 

 l'alcool à 50 pendant une heure. On détache la lamelle, on lave à 

 l'eau et on colore. Après ce mode de llxation, le Bomanovsky 

 réussit très bien : on surcolore par le Giemsa et on différencie 

 dans de l'eau légèrement acidulée. Il faut éviter de sécher les 

 préparations et, dans ce but, employer le procédé pour frottis 

 humides. 



Brumpt emploie le 'procédé de la salive^ qui consiste à 

 mélanger sur la lame le matériel à fixer avec un peu de salive ou 

 de mucus nasal. On fait ensuite un frottis humide; la petite quan- 

 tité de salive suffit pour faire adhérer les Amibes. 



