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METHODES SPECIALES 



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sons qu'à ceux des Maumiifères. Hrunipl a reconnu que les pre- 

 miers donnent de plus belles cultures dans ces conditions que sur 

 des milieux au sang de Poisson (Raie, Chien de mer). 



Pour Texamen, on pn'lève un peu de liquiile avec 

 une pipette stérile ou encore, dans certains cas, on 

 enlève les petites colonies formées par les Flagellés. 

 On examine en goutte pendante ou en frottis colorés. 

 Les meilleurs frottis sont obtenus, d'après Nicolle, en 

 centrifugeant le liquide additionné d'un peu de solution 

 physiologique ; on aspire le liquide clair, on lave avec 

 un peu de solution physiologique et on centrifuge de 

 nouveau. On rejette alors le liquide et on étale le culot. 



Pour préserver les tubes de la dessiccation, on les 

 capuchonne avec des capuchons stériles ou mieux, 

 d'après Manceaux, on recouvre chaque tube d'un autre 

 tube stérilisé bouché à Fouate (fif . 185). 



Milieu au sang chauffé. — Mathis * est arrivé à 

 cultiver certains ïrypanosomes, ainsi que les Leish- 

 mania sur un milieu préparé en ajoutant simplement, 

 à un volume de gélose nutritive (ou mieux de gélose 

 salée de Nicolle), un ou deux volumes de sang défi- 

 briné de Bœuf ou de Cheval (ou d'un autre animal). 



Le mélange est effectué avec la gélose refroidie aux 



environs de 50°, après avoir été fondue à 100°. On 



roule soigneusement les tubes, puis on les incline. 



, Après soliditication, stériliser, soit par plusieurs chauf- 



Mauceaux fagcs à 75-80° OU 100'\ pendant une heure; soit à 



pour con- l'autoclavc à 120°, pendant quinze minutes. Les sub- 

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tubes de slauccs toxiqucs pour les Trypanosomes se trouvent 

 milieu Ni- détruites en même temps. Si l'eau de condensation est 



colle . — . ' 



Original, insuffisaute, ajoutcr qiielques gouttes d'eau physiolo- 

 gique stérile, avec une pipette stérile. 

 Milieu liquide hémoglobinisé. — Row - remarque que 

 l'hémoglobine est l'élément nécessaire pour la culture des Leish- 

 mama et organismes voisins; il est bon que l'hémoglobine soit 

 dissoute dans un milieu fluide et ne soit pas contenue dans les 

 hématies. 



Fig. 185. — 

 P r e é dé 

 du double 



1. C. R. Soc. de bioloi/ie, LXI, p. 550, 1906 et LXXI. p. 538, 1911. 



2. R. Row, A simple haz-moglobinized saline culture médium, for the growth 

 of Leishmania and allied Protozoa. Brit. med. journ., I, p. 1119, 1912. 



