ANALYSE CHROMATIQUE ET MICROCHLMIE 671 



1 p. 100 de naphlol a, acklilioniiée de deux gouttes de lessive de 

 soude, puis, pendant cinq minutes, par une solution à i p. 100 

 de dimélhylparapliénylènediamine. Laver et examiner dans Feau 

 ou la glvcérine. Colore les leucocytes de la série mvéloïde. 



3. Distinction du protoplasma mort et vivant. — Gela 

 revient à pratiquer les colorations vitales (voir à ce sujet p. 248, 

 ainsi que la mi'tliode d'Achard et Ramond pour le diagnostic de 

 la vitalité des leucocytes, p. 625). 



Réactions spéciales. 



Fer. — Il faut d'abord libérer ou démasquer le fer combiné, puis le 

 caractériser. Pour démasquer le fer, on traite les coupes par l'alcool 

 acide (acide sulfurique à 4 p. 100 ou acide azotique à 3 p. 100 dans 

 l'alcool à 95°). On lave à l'alcool pur, puis à l'eau distillée et on traite 

 pendant cinq minutes par un mélange à parties égales de fcrrocyanure 

 de potassium à 1,5 p. 100 (fraîchement préparé) et d'acide chlorhydrique 

 à 0,5 p. 100. Ou peut aussi faire ag-ir successivement ces deux réactifs 

 (ferrocyanure suivi de glycérine chlorhydrique). Au contact du fer il se 

 forme du bleu de Prusse (voir aussi p. 681). D'après Prenant, cette réac- 

 tion est la plus sûre: elle réussit après tous les fixateurs et permet de 

 faire ensuite des colorations, par exemple par la safranine. On peut 

 employer aussi le sulfocyanure de potassium qui donne, avec les sels 

 de fer au maximum, une coloration rouge intense et caractéristique. 



Cuivre. — Après fixation par Talcool, le ferrocyanure de potassium 

 donne une coloration rouge. La diphénylcarbazide est très sensible 

 (Cazeneuve) et donne une coloration violette. 



Phosphore. — Méthode de Mac Callum i : fixer les tissus par l'alcool 

 et les traiter dix minutes, à 35", par une solution de molybdate d'ammo- 

 nium acidulée par l'acide azotique, puis laver à l'eau. Il se produit du 

 phosphomolybdate d'ammonium qui se colore en vert (oxyde de molyb- 

 dène), au contact d'une solution fraîche de chlorhydrate de phénylhy- 

 drazine à 1 à 4 p. 100. Le molybdate seul ne donne rien avec ce réactif 

 ou seulement une coloration brunâtre. Voir d'autres méthodes, 

 p. 729. 



Sels de calcium. — Autant ces sels sont faciles à caractériser 

 macroscopiquement, autant les procédés microchimiques sont douteux 

 et incertains. Un des meilleurs est celui de Grandis et Mainini - : 

 surcolorer dans la purpurine en solution alcoolique, puis traiter par la 

 solution de chlorure de sodium qui donne, au contact des sels de chaux, 

 du chlorure de calcium. Ce dernier précipite la purpurine. On monte 

 ensuite au baume. Il faut savoir aussi que l'hématéine colore en violet 

 intense toutes les parties des tissus en voie de calcification. 



Amidon. — La coloration bleue par l'iode (liquide de Lugol pur ou 

 dilué) est trop connue pour qu'il soit nécessaire d'insister. 



1. Proc. Roy. Soc, LXIII, p. 467, 1898. 



^2. Arch. ital. de biol., XXXIV, p. 73-78, 190Û. 



