708 METHODES SPÉCIALES 



il est bon d'employer une pipette coudée (fig. 265). La goutte 

 ne doit être ni tro[> petite, car elle s'évaporerait facilement, ni 

 Iro}) grosse, car elle pourrait loucher les bords de la cellule. 

 J'ai déjà dit (p. 244) que, sur les lames flambées, les liquides 

 ont une fâcheuse tendance à s'étaler. On peut, pour obvier à 

 cet inconvénient, sortir les lames de 'l'alcool et, sans les essuyer, 

 allumer le liquide et le laisser brûler. 



Ensemencement. — L'idéal, pour une culture en cellule, est 

 d'ensemencer une seule spore. Malheureusement l'obtention de 

 cette spore unique est un procédé long et délicat. Pour y parvenir, 

 il faut faire une émulsion de spores, en s'arrangeant de manière 

 à ce que chaque goutte renferme une spore. On dépose des gouttes 

 sous une série de lames llambées et on choisit au microscope 



celles (|ui renfer- 

 ment une seule 

 spore. 



On peut générale- 

 ment se dispenser 



Fig. 267. — Support en baguettes de verre pour colo- . , ' » • 



rations et ensemencements. — Original. UC Cetie preCaUllOU, 



surtout si on part 

 d'une culture pure. Il suffit alors d'ensemencer un très petit 

 nombre de spores. Pour cela, on fait une première émulsion 

 de spores sous une lame flambée et on prélève une trace de 

 cette émulsion qu'on ensemence sous la lame préparée. 



Fermeture. — Prendre une des cellules, la retourner et la 

 poser face en dessus sur la table. Sans tarder, appliquer la lame 

 ensemencée sur la cellule, en mettant la goutte bien au milieu et 

 en prenant bien soin qu'elle ne puisse toucher les bords de l'an- 

 neau de verre. On peut fermer à la vaseline qu'on applique au 

 pinceau, en tenant le petit appareil entre le pouce et l'index. Je 

 trouve préférable de lu ter à la paraffine tendre qu'on applique 

 avec le fer à lu ter (fig. 181). Il peut être avantageux, dans cer- 

 tains cas, de mettre au fond de la cellule une goutte d'eau stéri- 

 lisée, pour éviter le dessèchement. Il faut savoir que, même à la 

 température ordinaire, cette eau se condense sur la lame supé- 

 rieure et augmente peu à peu le volume de la goutte. 



ture à un fort grossissement (300 diam.) il est indispensable d'opérer sur 

 lamelles, qui permettent seules l'emploi d'objectifs à court foyer. Dan.s ce cas, on 

 fixe la lamelle dans une pince de Cornet ou de Debrand et on fait ainsi très 

 commodément l'ensemencement en dessous, exactement comme pour une lame. 



