718 METHODES SPECIALES 



les meilleurs résuUats est encore celle de Lignières* que j'emploie 

 comme il suit : 



1. Colorer à l'hémaléiae, différencier et virer comme d'habi- 

 tude (p. 374). 



2. Colorer au violet pliéniqué (p. 39i) pendant trois minutes à 



froid. 



3. Laver rapidement àTeau. 



4. Faire agir le Lugol (p. 395) pendant une minute. 



5. Sans laver, décolorer par la solution de Lignières 



Alcool 40 cm-^. 



Acétone 10 — 



Acide acéli(iue cristallisable 1 • — 



^ol. aq. sat. de fuchsine acide VI gouttes. 



jusqu'à ce que la coupe prenne une coloration rouge vif et que 

 les grains d'actinomycose restent seuls colorés en violet (surveiller 

 au microscope). 



6. Différencier dans de l'eau propre, jusqu'à ce que les mas- 

 sues apparaissent en rouge vif sur un fond rose très clair. A ce 

 moment, laver à l'eau acétifiée pour arrêter la décoloration. 



7. Alcool absolu, xylol, xylol acétique (p. 422), baume. 



On peut aussi faire un Gram ordinaire et colorer ensuite le fond 

 et les massues par Téosine, en différenciant comme il est dit p. 419 

 ou par la rubine acide à 1 p. 100, en différenciant comme plus 

 haut. 



Lorsque la préparation est bien réussie, les noyaux sont viola- 

 cés, les protoplasmes rosés, le collagène et les massues rouge vif, 

 les filaments mycéliens bleu violet très foncé. Si on a soin d'acé- 

 tifier le xylol, la conservation est assez bonne. 



Cultures. — L'isolement est diflicile à cause de la présence des 

 autres Bactéries, mais c'est le seul procédé qui permette d'idenlilier 

 sérieusement les Discomyces ~. Les cultures aérobies se font sur gélose 

 sucrée à 1 p. 100 dans les conditions, ordinaires. Pour les cultures 

 anaérobies, on emploiera le procédé suivant : 



1. Prendre les grains dans des lésions fermées, puis les laver au 

 bouillon stérile ou à l'eau stérile. 



2. Choisir un grain et l'écraser entre deux lames. Pour l'actinomycose 

 du Bœuf, vérifier si ce grain renferme bien des filaments, en exami- 

 nant dans l'eau stérile. 



1. Arch. de ■parasitologie. VIL p. 444. 1903. 



2. Ravaut et Pinoy. Sur une nouvelle forme de discomycose cutanée. Ann. de 

 dermat. et de ayphU., X, p. 417-43-2, 1909. 



