TECHNIQUE MYCOLOGIQUE 719 



3. Semer le produit de la dissociation dans un tube de gélose ordi- 

 naire, additionnée do I p. lUO de dextrose et liquéliée à 40° ou 45". Bien 

 ag'iler avec le lit de plaliue, pour répartir le produit dans toute la masse 

 du milieu de culture. Laisser refroidir sans incliner. Mettre ù l'éluve 

 à 37". Les colonies se développent en deux à huit jours dans la profon- 

 deur de la gélose. 



4. Repiquage. Extraire la gélose du tube et prélever les colonies en 

 la découpant avec une forte spatule de platine. Choisir les colonies au 

 microscope, en examinant les fragments entre lame et lamelle llambées, 

 à un faible grossissement. Laver à nouveau dans du bouillon stérile. 

 Ensemencer comme précédemment, dans la profondeur de la gélose, 

 et mettre à l'étuve. 



Pour faciliter ces opérations, employer des tubes de Burri, ouverts 

 aux deux extrémités et fermés d'un coté par un bouchon de caoutchouc : 

 il est facile d'en extraire le cylindre de gélose. 



Lorsque les grains sont très souillés de Bactéries, on prati([ue le 

 premier ensemencement comme il a été dit plus haut et, en outre, on 

 met quel([ues grains, bien lavés, dans des tubes secs et stériles qu'on 

 garde à l'obscurité et à la température ordinaire, pendant deux ou trois 

 semaines. On fait ensuite des ensemencements avec ce matériel con- 

 servé, après la mort de la majorité des Bactéries. 



Sporotrichose. 



Le diagnostic ne peut êlre fait que par les cultures, car il est 

 très difficile de déceler le Chaïupignon dans les pus des lésions, 

 où il n'existe que sous la forme d'élémenls ovoïdes dissociés, ou 

 conidies-levures. Pourtant, Pinoy et iMagrou ont obtenu de bonnes 

 colorations de ces conidies-levures avec la méthode de Glaudius 

 (p. 396), légèrement modifiée par Brédré; les temps sont simple- 

 ment augmentés : vingt minutes pour la coloration au violet et 

 dix minutes de contact avec la solution picriquée. 



Prélèvement. — Dans les lésions fermées, on puise le pus ou 

 la sérosité sanguinolente avec une seringue stérilisée. Pour les 

 lésions ouvertes, on ensemence le pus qui est sous la croûte ou 

 bien on nettoie à Teau bouillie et on fait sourdre delà sérosité : 

 les cultures ainsi obtenues sont presque toujours pures d'em- 

 blée. 



Ne pas craindre d'ensemencer largement en strie et de faire de 

 nombreux tubes (au moins cinq ou six). Ensemencer sur gélose 

 glycoséede Sabouraud ou sur carotte. Laisser les tubes non capu- 

 chonnés à la température ordinaire. Les colonies typiques appa- 

 raissent du cinquième au douzième jour. 



A défaut de milieux de culture, on peut conserver le pus peu- 



