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tion d'une pellicule irisée. Ce colorant ne se conserve pas et doit être 

 préparé au moment de l'emploi. 

 Violet phéniqué. — Triturer dans un mortier : 



Cristal-violet l gr- 



Alcool à 90" ' 10 cm3. 



Acétique phéniqué crist 2 gr. 



On dissout d'abord le colorant dans l'alcool puis on ajoute peu à peu 

 l'acide phéniqué. Quand le mélange est bien homogène, on rince le 

 mortier avec de l'eau, par petites portions, qu'on reverse au fur et à 

 mesure dans un flacon; il faut employer 100 ce. d'eau. On filtre après 

 24 heures de repos. Cette solution peut se conserver très longtemps lors- 

 qu'elle a été bien préparée. 



Dans certains ouvrages, on conseille de mélanger simplement une 

 solution alcoolique de violet avec de l'eau phéniquée. A mon avis, ce 

 procédé est mauvais : on obtient généralement un liquide trouble presque 

 dépourvu de pouvoir colorant. 



Ces violets s'emj)loienl comme la safranine ; on différencie par 

 Talcool absolu, additionné d'acide clilorhydriqne (1 p. 1000) ou 

 d'acétone (voir Gram-Nicolle). Les colorations sont des plus 

 intenses, mais ne se conservent pas indéfiniment. A l'emploi des 

 accentuateui's (aniline, acide pliéni(|ue) on joint très souvent le 

 mordançage par l'iode, qui agit ici d'une façon particulière, 

 connue sous le nom de méthode de Gram. 



Méthode de Gram. — Elle repose sur ce fait que les couleurs 

 dérivées de la pararosaniline (violet de gentiane, violets penta et 

 hexaméth} lés, bleu Victoria) forment avec l'iode une combinaison 

 que l'alcool ne peut dissocier. Certains éléments (chromatine 

 en mouvement dans les figures de karyokinèse, certaines Bacté- 

 ries) ont pour cette combinaison une affinité telle que l'alcool ne 

 peut l'entraîner : on dit alors que ces eiémenis pi^enn en t le Gram. 

 D'autres ne possèdent pas celte affinité, ne prennent pas le 

 Gram, et abandonnent à l'alcool la combinaison iodopararosaniline. 

 Celle-ci n'est pas dissociée, mais entraînée. La coloration des 

 parties qui prennent le Gram est due, non au violet, mais à la com- 

 binaison iodée, car elles prennent une teinte bleu noir. 



Cette réaction ne se produit pas avec les couleurs dérivées de 

 la rosaniline (fuchsine, magenta, diamantfuchsine, solferino, etc.). 

 Celles-ci forment avec l'iode une combinaison instable qui est 

 dissociée par l'alcool : ce dernier entraîne l'iode et laisse la couleur 



1. Beaucoup d'auteurs indiquent Talcool aljsolu. Je ne vois pas très bien 

 pourquoi, car la couleur se dissout aussi bien dans l'alcool à 90° et il me semble 

 inutile de prendre de l'alcool absolu pour l'hydrater ensuite. 



