402 METHODES GENERALES 



ainsi un colorant neutre susceptible de cristalliser, qui peut donc être 

 purifié. Ces colorants neutres se précipitent au moment du mélange, 

 parce qu'ils sont insolubles dans l'eau. Mais, pour ol)tenir une précipi- 

 tation complète, il faut opérer avec beaucoup de soin, car le précipité est 

 soluble dans un excès de colorant basique et surtout do colorant acide. 

 Gomme ces colorants sont insolubles dans l'eau, il faut tourner la 

 difficulté pour arriver à obtenir des colorations. Plusieurs méthodes ont 

 été proposées : 



1. Dissoudre dans un excès du colorant acide (Ehrlich). 



2. Dissoudre dans un excès du colorant basique (Rosin). 



3. Dissoudre le colorant neutre par ébuUifion (Laurent). 



4. Appliquer le colorant neutre à l'état naissant, car, à ce moment, il 

 manifeste un maximum d'acLivifé. On mélange les colorants acide et 

 basique au moment d'effectuer la coloration (procédé primitif de 

 llomanovsky, méthodes de Ziemann, de Nocht et toutes les variantes à 

 l'eau du procédé de Romanovsky). 



5. Dissoudre dans un liquide indifférent, tel que l'alcool métliylique 

 (Jenner, Leishman, May-Grïmwald, Giemsa). 



De ces cinq méthodes c'est la dernière, imaginée par Jenner, qui 

 paraît devoir être seule conservée. 



Les remarquables résultats obtenus avec les éosinates de bleu de 

 méthylène, d'azur de métliylène et de violet de méthylène ont accaparé 

 l'attention des techniciens, au point de leur faire négliger complète- 

 ment les autres colorants neutres. On obtient avec ces éosinates des 

 colorations panoptiques superbes, mais on pourrait peut-être avoir aussi 

 des résultats féconds avec d'autres corps neutres. 



Personnellement, j'avais entrepris, il y a quelques années, toute une 

 série de recherches expérimentales sur les corps neutres obtenus en 

 précipitant la série des colorants basiques usuels (vert de méthyle, 

 violet héxaméthylé, bleu de toluidine, bleu de méthylène pur ou trans- 

 formé partiellement en azur) par des colorants acides (éosines diverses, 

 rubine acide, orange G, vert lumière). Les solutions de colorant basique 

 et acide étaient mélangées de telle sorte que la précipitation fût aussi 

 complète que possible; le précipité était recueilli sur un filtre, longue- 

 ment lavé à l'eau distillée, desséché, puis dissous dans l'alcool méthy- 

 lique pur, suivant le procédé de Jenner Pour colorer, je versais sur le 

 frottis ou la coupe, un mélange en proportions variables, déterminées 

 par tâtonnements, de solution alcoolicjue et d'eau distillée. J'obtenais 

 toujours des colorations nucléaires presque instantanées, mais jamais 

 une élection spécifique sur la chromaline des Protozoaires aussi nette 

 que celle de l'éosinate d'azur. Les combinaisons qui ont donné les 

 meilleurs résultats étaient bleu de toluidinc-orange G et violet de 

 gentiane-orange G. 



Éosinates de bleu de méthylène, de bleu de toiuidine, 

 d'azur de méthylène, de violet de méthylène. — Les seuls 

 colorants neutres employés couramment sont, d'une part, les 

 éosinates de bleu de méthylène et de blende toluidine ei, d'autre 

 part, le mélange complexe de bleu de méthylène et d'éosinates d'azur 

 et de violet de méthylène qu'on nomme mélange de Romayiovsky. 



