COLORATIONS PAR LES COULEURS D'ANILINE 413 



lY. Procédé de Leishman'. — Cotte méthode est encore très en 

 usage dans les pays de langue anglaise, mais, à mon avis, elle ne vaut 

 pas les procédés de Pappenheim. 



1" Fixation. — Verser sur le frottis 6 gouttes de solution de 

 Leishman -, couvrir avec une boîte de verre bien sèche, laisser agir 

 30 secondes. 



2° Coloration. — Découvrir le frottis et verser sur la lame un 

 nombre de gouttes d'eau distillée double de celui des gouttes de la 

 solution de Leishman, soit 12 gouttes. Mélanger avec soin, en balantjant 

 la lame et laisser agir cinq à dix minutes. 



3" Différenciation à l'eau distillée. — Ce temps est très important 

 et doit être contrôlé au microscope. 11 a pour but de dissoudre le pré- 

 cipité, de préciser la coloration rouge des noyaux des Protozoaires et de 

 donner aux hématies une teinte rosée. 



4° Sécher au buvard et examiner dans l'huile de cèdre. 



Procédés applicables aux frottis humides. 



Voir p. 628 la méthode de préparation et de fixation des frottis 

 humides. La coloration peut être efl'ectuée soit par le procédé de 

 Giemsa, soit par les méthodes de Pappenheim (panoptique et pan- 

 chrome). Pour ces deux dernières méthodes, procéder comme il 

 est indiqué pour les coupes (p. 416). 



Procédé de Giemsa ^ — 1° Fixation. — Dans le subhmé 

 alcoolique de Schaudinn (p. 283), pendant douze à vingt-quatre 

 heures. 



Giemsa trouve que le sublimé est très supérieur à l'alcool et au 

 formol qui modifient trop la structure de la chromatine et l'empêchent 

 de prendre la teinte azurophile caractéristique. En outre, le sublimé est 

 facile à éliminer par l'iode. Je crois, néanmoins, qu'on peut très bien 

 fixer au Bouin; dans ce cas, le traitement à l'iode est inutile, il suffit 

 d'éliminer complètement l'acide picrique (p. 271 et 348). 



2° Lavage : Premier temps. — Laver rapidement à Teau et 

 plonger cinq à dix minutes dans du Lugol faible * ainsi constitué : 



1. Journ. Roy. micr. Soc. London, p. 715, 1901. — Brit. med. jown., II, p. 757, 

 1901. 



2. Acheter chez Grûbler la solution toute faite ou le colorant sec qu'on dissout 

 dans l'alcool méthj-Iique pur à la dose de 0,15 p. 100. Les produits Soloïd sont 

 aussi très bons. 



3. Giemsa, Ueber die Fârbung von Feuchtpraparaten mit meiner Azur- 

 Eosinmethode. Deutsche med. Wocli., p. 1751, 1909. 



4. L'emploi du Lugol est indispensable, car la solubilisation du sublimé par 

 l'iodure de potassium seul aboutit à la production d'un précipité opaque de 

 mercure métallique provenant de la dissociation du proto-iodure de mercure (p. 295, 

 note 1). 



