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c'est la méthode de choix pour lélude des détails de structure des 

 noyaux et de Tappareil locomoteur. Les frottis doivent avoir été 

 fixés humides par le sublimé ou le Mann. Le principe est de pro- 

 longer les séjours clans le mordant et dans le colorant. 



a. Le frottis, préalablement fixé, est d'abord plongé pendant 

 une heure dans l'alcool absolu, puis passé par une série d'alcools, 

 en descendant de 10 en 10 degrés jusqu'à l'eau distillée. 



b. Mordaneage dans Falun de fer à 3,5 p. 100 pendant une 

 nuit (voir p. 377). 



c. Lavage rapide à Teau distillée. 



d. Coloration dans Thématoxyline à 0,5 p. 100 pendant vingt- 

 quatre heures. On obtient cette solution en mélangeant parties 

 égales d'eau distillée et de la solution suivante : 



Hématoxyline 1 gr. 



Alcool à 'OO 10 cm3 



Eau dist 90 — 



Les lamelles doivent flotter sur les solutions colorantes, et ne pas 

 y être immergées. 



e. Différenciation, qui est Topérationla plus importante. Après 

 lavage à Teau distillée, iMinchin plonge la lamelle dans la solution 

 d'alun de fer, jusqu'à ce qu'elle paraisse se décolorer; on lave 

 alors à Teau et on examine à 400 diamètres. Si le karyosome 

 apparaît nettement, la diflerenciation est suffisante, sinon il faut 

 recommencer. Il est inutile de faire une coloration de fond. 



Il est bon de préparer plusieurs lamelles et de les différencier 

 inégalement, de manière à mettre en évidence divers points de 

 structure. Plus la différenciation est poussée loin, plus le cyto- 

 plasme devient pâle. 



Mincliin garantit luniformité des résultats obtenus, pourvu que le 

 frottis n'ait pas séché et que la fixation ait été correcte. Lorsque le 

 Romanovsky et l'hématoxyline ferrique donnent des résultats contra- 

 dictoires, au point de vue de la structure nucléaire, c'est toujours à la 

 métliodo au fer que l'on doit accorder confiance. 



3. Méthode de Tworl. — Mincliin indique, d'après Twort, la manière 

 de préparer le colorant : mélanger deux solutions à demi-saturées de 

 rouge neutre et de vert lumière de Griibler dans l'eau distillée, verser 

 lentement le vert dans le rouge, placé au préalable dans un vase très 

 large; chauffer le liquide à + 30" ou 40". l^assembler le précipité par 

 décantation, sans filtrer : le laver à Teau distillée et le sécher à + 37". 

 On pèse 0,2o gr. de ce précipité, on triture avec un peu de sable blanc 

 et on épuise par 100 cm-^ d'alcool méthylique, renfermant 5 p. 100 de 

 glycérine. 



