666 METHODES SPECIALES 



Vivipanis viviparus {Paludina vivipara), présente, dans son testicule, un 

 matériel remarquable pour l'élude de ces formations. Ce Mollusque est 

 un petit Gastéropode operculé, dioïquc, h coquille conique surbaissée, 

 à sept tours de spire très saillants, et ornée de trois bandes spirales brun 

 foncé. Il présente deux longs tentacules inégaux. 



Ergastoplasme. — Pour mettre en évidence ce protoplasme supérieur, 

 propre aux cellules sécrétrices i, on emploie les fixateurs ordinaires et, 

 de préférence, des colorants basiques (bématoxyline, safranine, bleu 

 de toluidine, bleu polychrome, etc.). 



Mitochondries "-. — Le procédé le plus électif est celui de Benda. On 

 fixe huit jours dans le Flemming- fort, en ayant soin d'employer de très 

 petites pièces. On lave une heure à l'eau courante, puis on procède au 

 mordançage ou chromisation secondaire. 



Cette opération comprend deux temps : un bain de vingt-quatre 

 heures, dans un mélange à parties égales d'acide pyroligneux pur et 

 d'acide chromique à 1 p. 100, puis un autre bain de vingt-quatre heures 

 dans le bichromate de potassium à 2 p. 100. On lave ensuite à l'eau 

 pendant vingt-quatre heures, puis on inclut à la paraffine. Couper à 

 5 [;., coller à l'eau distillée et mordancer vingt-quatre heures dans 

 l'alun de fer à 4 p. 100. Laver rapidement et colorer vingt-quatre 

 heures dans le sulfalizarinate de sodium (eau distillée additionnée de 

 sol. alcoolique de ce sel jusqu'à couleur ambrée). Égoutter et colorer 

 au krystalviolet aniline : 



Krystalviolet à saturation dans l'alcool à 70° . . 1 vol. 



Alcool à 70", chlorhydrique à 1 p. 100 1 — 



Eau d'aniline saturée 2 — 



Étendre de son volume d'eau au moment de l'emploi. Colorer cinq 

 minutes à chaud, différencier une minute dans l'acide acétique à 

 30 p. 100, puis à l'alcool absolu (moment délicat) et monter au baume. 

 Les mitochondries sont violet intense, le reste brun rouge plus ou 

 moins foncé. 



Tout récemment, E, Laguesse a- proposé une méthode pour la colo- 

 ration vitale des mitochondries (chondriosomes) par le vert janus 3. 

 Cette coloration est élective, mais inconstante. 



Karyokinèse. — Les meilleures méthodes, pour l'étude de la karyoki- 

 nèse, sont l'hématoxyline ferrique de Heidenhain (p. 377), le trichro- 

 mique de Cajal (p. 420) et en général les méthodes par les colorants 

 basiques. 



A titre d'exemple d'une méthode embryologique, je donnerai la 

 méthode de Pierre Masson pour l'élude de l'évolution des œufs de VAscaris 

 megaiocephala du Cheval. Ce matériel, très facile à trouver, est excellent 

 pour démontrer tous les stades de la maturation, de la fécondation et de 

 la segmentation. 



1. Sectionner les oviductes et les plonger dans un tube d'alcool au 



1. Prenant. Sur le protoplasme supérieur (archoplasme, kinoplasme, ergasto- 

 plasme). Étude critique. Journ. de l'Anat. et PhijsioL, XXXIV et XXXV, 1898-1899. 

 — Les mitochondries et l'ergastoplasme, ibid., XLVI, p. 217-285, 1910. 



2. Fauré-Fremiet. Études sur les mitochondries des Protozoaires et des cel- 

 lules sexuelles. Arch. Anat. viicr., XI, p. 457-648, 4 pi., 1910. 



3. C. R. Soc. de biologie, LXXIII, p. 150, 1912. 



