TECHNIQUE BACTERIOLOGIQUE 693 



5" Colorer par le procédé de Ziehl-Neelsen. — Déposer sur le 

 frottis quelques gouttes de liquide de Ziehl (p 397). Tenir la lame 

 avec une pince de Debrand (lig. Î266) et la porter sur la platine 

 chauffante (fig. 147) ou au-dessus d'une très petite flamme. 

 Chauffer jusqu'à apparition de vapeurs (pas plus loin! le liquide 

 ne doit pas bouillir) et retirer immédiatement du feu dès que les 

 vapeurs apparaissent. Recommencer trois fois cette opération, 

 puis laver longuement à Tcau. Il va sans dire que la préparalion 

 ne doit pas se dessécher et que, si le liquide s'évapore, il faut se 

 hâter d'en ajouter une nouvelle quantité. 



6^ Décolorer p^v l'acide azotique au tiers ' (eau distillée 2 vol., 

 acide azotique 1 vol.) ou par l'acide sulfuri(jue au quart, pendant 

 quelques secondes, puis laver à grande eau. La préparation, 

 d'abord jaunâtre, redevient rosée. 



7° Décolorer à fond par l'alcool absolu, jusqu'à teinte rosée à 

 peine visible, puis laver à l'eau. 



8" Colorer quelques instants par une solution aqueuse de bleu 

 de méthylène d'un titre quelconque, plutôt faible. 



9° Laver, sécher, examiner dans l'huile de cèdre. 



Les Bacilles sont colorés en rouge, le reste en bleu : rechercher 

 les Bacilles dans les parties minces. 



Méthode de Spengler - à l'acide picrique. — Faire un Ziehl (chauffer 

 très peu), puis, sans laver, traiter la préparation pendant deux ou trois 

 secondes par l'alcool picrique (parties égales d'alcool à On" et de solution 

 aqueuse saturée d'acide picri({ue); lavera l'alcool à 60"; décolorer par 

 l'acide azotique à lo p. 100 (30 secondes), laver de nouveau à l'alcool à 

 60°, puis à l'alcool picrique. Laver à l'eau distillée et sécher. 



Excellente méthode, très rapide et mettant remarquablement les 

 Bacilles en évidence, même sous leurs formes les plus diflicilement 

 colorables. 



Méthode de Gasis 3, — La méthode de Ziehl-Neelsen et les procédés 

 analogues sont fondés sur Vacido-résistance du Bacille de la tuberculose, 

 c'est-à-dire sur la propriété qu'il possède de se colorer par les couleurs 

 basiques et d'abandonner très diflicilement ces couleurs sous Taction 

 des acides. 



La méthode de Gasis est basée, au contraire, sur V alcali-résistance, 



1. On a proposé l'emploi d'autres acides moins énergiques : acide citrique ou 

 tartrique à 10 p. 100 dans l'eau, et surtout acide lactique à '■J p. 100 dans l'alcool 

 (méthode de Ilauser). Ces produits ont une action moins brutale et sont beau- 

 coup plus faciles à employer. Malheureusement ils ne donnent pas toute sécu- 

 rité pour le diagnostic, car ils ne décolorent pas les Bacilles accidentellement 

 acido-résistants. La méthode de Ziehl-Neelsen donne seule une sécurité absolue. 



2. Dtsch. med. Woch., n" 9. -28 février 1907. 



3. Centi^alblatt fïir Bakleriolocjic, Orig., L, p. 126, 1909. 



