694 METHODES SPECIALES 



c'est-à-dire sur la propriété de se colorer par les colorants acides, addi- 

 tionnés d'un mordant, et de retenir ce colorant malgré l'action des alcalis. 



1. Additionner 5 cm^ de solution d'éo.sine (éosinc 1, alcool 5, eau 95) 

 d'un morceau de sublimé gros comme une lentille et chauffer lente- 

 ment jusqu'à dissolution. Le colorant est transformé en précipité en 

 suspension. 



2. Couvrir pendant deux minutes, avec ce liquide chaud, le frottis 

 fixé à la flamme. 



3. Laver à l'eau et décolorer par : 



Soude caustique 0.5 gr. 



lodure de potassium 1 — 



Alcool à 50 p. 100 100 cm3 



jusqu'à ce que la couleur rouge ait disparu et que la préparation 

 devienne grise. Laver à fond à l'alcool absolu. 



4. Colorer le fond au bleu de méthylène. 



Cette méthode, qui montre bien la structure des Bacilles, est assez 

 compliquée et délicate et ne parait pas devoir détrôner le procédé de 

 Ziehl 1. J'en dirai autant du procédé de Much qui n'est qu'un Gram 

 modillé, et de la méthode d'Hermann. 



Méthode de Biot-. — Ce procédé, très peu connu, même en France, 

 mérite d'être signalé à cause de sa simplicité. On procède comme pour 

 le Ziehl-Neelsen, puis on renforce la coloration par une immersion de 

 quelques minutes dans le formol pur. I^es Bacilles prennent une belle 

 teinte violacée, presque noire, qui dispense de faire une coloration 

 de fond. 



Coloration dans les coupes. — Colorer au Ziehl-Neelsen à froid, 

 pendant 15 à 30 minutes; si on craint l'action trop brutale de l'acide 

 azotique, employer la méthode de Kûhne-Borrel : après coloration au Ziehl, 

 traiter la coupe, pendant quelques secondes, par le chlorhydrate d'ani- 

 line à 2 p. 100, puis décolorer par l'alcool absolu. Colorer le fond au bleu 

 de méthylène. On peut aussi employer la méthode de h>pengler (p. 691). 



Méthodes d'enrichissement. — Les Bacilles sont quelquefois 

 très rares dans les crachats ou localisés dans des parcelles qui 

 échappent à Texamen. On a donc cherché des méthodes qui per- 

 mettent d'enrichir, c'est-à-dire de concentrer tous les Bacilles dans 

 un très faible culot, (ju'on étale en entier et qu'on colore. Depuis 

 quelques années, ces procédés d'enrichissement ont pris une 

 importance considérable et ont donné naissance à une littérature 

 énorme, ce qui, d'ailleurs, démontre leur insuffisance et leur 

 imperfection. 



1. Berger dans Cenlralblalt fur Bakterioloijie, Orig., LUI, p. 174-208, 1910, 

 Rosenblatt, ibidem, LVIII, p. 173, 1911, Bohm, ibidem, LXII, p. 497, 1912, Maca- 

 lister, Brit. med. journ., II, p. 111, 1912, ont donné de bonnes revues critiques des 

 divers procédés de coloration du Bacille de la tuberculose, avec une abondante 

 bibliographie. Tous concluent à la supériorité de la méthode de Ziehl-Ncclsen. 



2. Biot, isouvelle métiiodc de coloration intensive des Bacilles de Koch. 

 C. li. Assoc. des anatomistes. Congrès de Lyon, p. 234-237, 190L 



