704 MÉTHODES SPÉCIALES 



Milieu de conservation : 



Eau de source 1 000 cm-^ 



Gélose 18 gr. 



Peptone granulée de Ghassaing- 30 — 



Gélose sucrée ordinaire : 



Eau de source 1 000 cm^. 



Glucose massée de Chanut 20 gr. 



Peptoae granulée de Gliassaing- 10 — 



Gélose 18 — 



Gélatine aux pruneaux : Faire tremper 10 pruneaux dans 250 cm3 

 d'eau pendant une nuit. Faire cuire à feu doux pendant une ou deux 

 heures, décanter, compléter à 250 cm^ et ajouter 15 p. 100 de gélatine. 

 Faire fondre au bain-marie. Répartir en tubes. Stériliser vingt minutes 

 à 110°. A la place de la gélatine on peut mettre 1,8 p. 100 de gélose. 



Fabrication des milieux de culture. — Elle exige quelques précau- 

 tions très simples, mais indispensables, ([ui ont été mises en lumière 

 par Sabouraudi. 



1" Chauffage. — Mélanger tous les éléments dans un grand ballon, 

 laisser la gélose s'imbiber pendant une demi-heure, puis porter à l'auto- 

 clave. Monter lentement à 120° avec une seule couronne de gaz, 

 éteindre dès qu'on atteint cette température. 



2° Filtralion. — Quand l'autoclave est redescendu à 100°, ouvrir et 

 bien agiter le ballon pour mélanger exactement le contenu. Mettre 

 dans l'autoclave deux iDallons de un litre, munis chacun d'un enton- 

 noir et d'un filtre plissé en papier Chardin. Répartir la gélose dans ces 

 deux entonnoirs. Dès qu'un des filtres ne laisse plus passer le liquide 

 que goutte à goutte, on enlève l'entonnoir, on le remplace par un autre 

 garni d'un filtre neuf, au-dessus duquel on crève le filtre engorgé. 

 L'entonnoir sale est lavé et garni d'un autre filtre. On continue, en s'ar- 

 rangeant de telle sorte que les filtres laissent toujours couler un filet 

 de liquide. On obtient ainsi une iiltration très rapide, avec un déchet 

 insignifiant et on évite l'emploi de l'appareil à liltrations chaudes dont 

 la lenteur est désespérante. L'autoclave éteint, mais encore chaud, 

 suffit pour maintenir la gélose à l'état liquide. 



Après Iiltration, on réunit le tout dans un même ballon et on agite 

 pour assurer l'homogénéité du liquide. 



3" Reparution. — Avec un entonnoir dont la douille porte un tube de 

 caoutchouc muni d'une pince de Mohr et d'un tube efhlé. Garnir 

 convenablement les tubes ou les matras coniques. Ne pas mouiller les 

 parties qui seront en contact avec le bouchon d'ouate. Boucher à l'ouate 

 ordinaire, mais ne pas faire les bouchons trop serrés, car ils ne séche- 

 raient pas après la stérilisation. 



4° Stérilisation. — Monter très lentement à 120° avec une seule cou- 

 ronne de gaz. Eteindre dès qu'on a atteint cette température. Aussitôt 

 que la pression est tombée, retirer immédiatement les tubes et les 

 incliner en les soutenant avec un gros tube de verre (lig. 261). 



1. Annales de Dermatoloyie, p. 93, 1908. — Arch. de Parasitoloyie, XII, p. 33, 

 1908. — Maladies du cuir chevelu, III, Maladies cryptogamiques, Paris, Masson, 

 1910, p. 113. 



