APPAREIL d'Éclairage 41 



moins grande faculté d'absorption pour les rayons lumineux. Si on se 

 sert d'un objectif parfaitement corrigé pour la totalité de son ouverture, 

 on peut éclairer la préparation avec un cône lumineux très large sans 

 que l'image disparaisse. Au contraire, ce sont les parties non colorées 

 et non absorbantes dont l'image disparaîtra, ce qui constitue un 

 avantage, par exemple pour la recherche des Bactéries colorées au 

 milieu d'éléments ou de tissus non colorés. 



Par contre, l'étroitesse du cône éclairant augmente le pouvoir péné- 

 trant de l'objectif et la planéilé du champ. On sait, en effet, que la 

 plupart des objectifs microscopiques donnent un champ qui paraît 

 plus ou moins courbe : il en résulte que l'image ne peut èlre mise au 

 point en même temps au centre et sur les bords. Plus le cône d'éclai- 

 rage est large, plus la zone centrale de netteté est étroite. Cet incon- 

 vénient est surtout sensible pour la microphotographie : dans l'obser- 

 vation oculaire, le mouvement constant de la vis micrométrique supplée 

 largement à ce défaut. 



On peut admettre, comme règle générale, que l'éclairage le plus 

 favorable est fourni par un cône lumineux, dont l'ouverture est égale 

 au tiers de celle de l'objectif et qui, par conséquent, n'éclaire que le 

 tiers de l'ouverture de cet objectif. On peut s'en assurer en enlevant 

 l'oculaire et en regardant dans le tube du microscope : on peut aussi 

 laisser l'oculaire en place et se servir d'une loupe pour contrôler la 

 largeur du cône d'éclairage. 



En pratique, il faut, pour toutes les préparations, faire varier la 

 largeur du cône éclairant en manœuvrant le diaphragme-iris. Cette 

 manœuvre, très facile, et qu'on arrive en peu de temps à exécuter 

 instinctivement, permet de trouve)- pour chaque objet l'éclairage 

 le plus favorable et qui fournit la meilleure définition. En général, 

 avec les objectifs à sec, on ouvre peu le diaphragme, surtout avec 

 les forts grossissements dont l'ouverture numérique est moindre. 

 Au contraire, avec les objectifs à immersion, et surtout lorsqu'on 

 examine des préparations intensément colorées, on peut l'ouvrir 

 entièrement et utiUser la totalité du cône lumineux. 



En général, les préparations colorées peuvent être examinées 

 avec un cône lumineux très ouvert, pourvu toutefois que l'objectif 

 puisse fournir une image nette dans ces conditions. Dans ce cas, 

 les contours qui apparaissent grâce à la différence de réfringence 

 sont moins marqués et les colorations ressortent mieux. Au con- 

 traire, s'il s'agit d'objets non colorés, c'est la différence de réfrin- 

 gence seule qui permet de distinguer les contours et d'apercevoir 

 les détails de structure : il faut alors employer des cônes lumineux 

 plus étroits. Pourtant, il ne faut pas descendre au-dessous d'une 

 certaine limite. Nous verrons en effet, en étudiant les propriétés 

 des objectifs (p. 75), qu'on peut arriver, au moyen de cônes lumi- 



