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2. Die Levulan erzeugenden Bakterien. Die Emulsionserscheinung hi 



Agarplatten. 



Fur die Isolierung der Levulan erzeugenden Bakterien wird eine Platte ange- 

 fertigt von folgender Zusammensetzung: Leitungswasser, 2% Agar, 2% Rohr- 

 zucker, 0,02% K 2 HPO 4 und 0,02% NH 4 C1, worauf, nach sorgfaltiger Sterilisation 

 zur Entfernung der resistenten, stets im Rohrzucker vorkommenden Bakterien, die 

 beschriebene Rohkultur in Impfstrichen oder als Streukultur ausgesat wird. Auch 

 kann darauf direkt pasteurisierte Erde ohne vorherige Rohkultur gebracht werden, 

 wobei dann auch wohl vereinzelte Levulankolonien erhalten werden, jedoch sehr 

 viel weniger wie nach dem zuerst genannten Verfahren. 



Auf den Agarplatten ist die Erscheinung der Levulanproduktion eine sehr 

 hiibsche, indem sich ringsum die Kolonien, sowohl innerhalb, wie auf der Ober- 

 flache des Agars eine, besonders beim durchfallenden Lichte sichtbar werdende Le- 

 vulanemulsion bildet (zu vergleichen die Figuren i und 2 auf Tafel XI), welche 

 den Agar zu einer betrachtlichen Volumvermehrung bringt und darin selbst die Ent- 

 stehung von Rissen verursachen kann. Die Levulantropfchen konnen eine Grosse 

 von bis 0,2 mM. erreichen und werden dann mit der Lupe leicht sichtbar; sie finden 

 sich bis auf Zentimeterentfernung von den Kolonien. Obschon dieselben an 01- 

 tropfen erinnern, zeigt ihre Loslichkeit in Schwefelsaure, dass von Fett hier nicht 

 die Rede sein kann. 



In Gelatinplatten ist die Erscheinung nur sehr unvollkommen. Im Agar wird 

 dieselbe durch Saurebildung beeintrachtigt. Darum ist bei der Versuchsanstellung 

 die Verwendung von Kaliumnitrat als Stickstoffquelle, woraus Kaliumcarbonat, also 

 Alkali entsteht, giinstig, wahrend die zu Saurebildung veranlassenden Ammonsalze 

 als Stickstoffquelle ungiinstig sind. Auch die Peptone und Amide begiinstigen bei 

 Gegenwart von Zucker die Saurebildung durch Bakterien, so dass deren Verwen- 

 dung ebenfalls zu meiden ist. Fertigt man Agarplatten an von obengenannter Zu- 

 sammensetzung, jedoch mit etwas mehr Rohrzucker, z. B. 10%, mit Weglassung des 

 gebundenen Stickstoffs und ohne zu sterilisieren, indem allein gekocht wird, so 

 bekommt man einen besonders giinstigen Boden fur den noch zu besprechenden, im 

 Rohrzucker selbst ganz allgemeinen B. emulsionis, sowie fur den gleichfalls Levulan 

 erzeugenden Azotobacter chroococcum. 



Ersetzt man den Rohrzucker durch Raffinose, so entsteht die Emulsionserschei- 

 nung ebenfalls. Glukose, Levulose, Mannose, Galaktose, Laktose, Maltose, Treha- 

 lose, Melibiose, Mannit und Xylose erzeugen die Erscheinung dagegen nicht, sincl 

 also ungeeignet fiir Levulanbildung. 



Obsohon die Levulanbazillen sehr allgemein vorkommen, gehoren dieselben nur 

 zu wenigen Arten, worunter der gewohnliche Heubazillus B. mesentericus vulgatus, 

 B. megatherium und der im Rohrzucker selbst so allgemeine B. emulsionis. Dagegen 

 sind die ubrigen besonders charakteristischen aeroben Bodenbakterien, wie B. sub- 

 tilis, B. mycoides, B. polymyxa, B. nitroxus, B. sphaerosporus, B. luteus, so wie die 

 Anaeroben Granulobacter butylicum, Gr. saccharobutyricum und G. pectinovorum 

 keine Levulanbakterien. 



Wenn man auf ahnliche Weise wie hier beschrieben, frische, nicht pasteurisierte 

 Erde untersucht, so stellt sich heraus, dass es nur sehr wenige nicht sporenbildende 



