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peut faire avec cette levure plusieurs experiences importantes, dans lesquelles, tout 

 comme dans la formation de graisse, on est frappe de la variabilite particulierement 

 grande du caractere pigment. 



Comme je 1'ai deja dit au commencement, il s'agit ici de la production d'un 

 chromogene incolore specifique qui produit le pigment rouge en se combinant avec le 

 fer et avec 1'oxygene de 1'air. Pour en etudier la formation on peut employer les 

 substratums les plus divers. L'agar a extrait de malt avec quelques milliemes de 

 citrate ferrique convient tres bien. Dans le cas ou on desire avoir un substratum de 

 culture incolore, la recepte suivante est a recommander: 



Eau de canalisation 100 



Agar 2 



Saccharose 2 



Glucose 2 



Peptone seche 0,1 



Asparagine 0,2 

 Phosphate acide de potassium o, i 



acidifiee par quelques gouttes d'acide phosphorique et melangee de 20 a 40 mgr. de 

 citrate ferrique. Dans ce cas, comme dans tant d'autres, on a constate qu'une nourri- 

 ture mixte produit une croissance beaucoup plus vigoureuse que les matieres nutri- 

 tives simples, prises isolement, ce qui explique cette composition un peu compliquee. 

 Au lieu de citrate ferrique on peut prendre tout autre sel ferreux ou ferrique soluble. 



Si Ton seme sur un pareil terrain un tres grand nombre de cellules, on obtient, 

 a 30 C., deja au bout de 24 heures une culture fortement developpee, qui, toutefois, 

 ne commence a presenter la couleur rouge qu'au bout de 2 fois 24 heures et devient 

 alors peu a peu de plus en plus foncee dans le champ de diffusion du fer. 



Si Ton n'a pas ajoute de sel de fer au terrain de culture, le developpement se 

 fait tout a fait fie la meme faqon, mais les colonies restent incolores ; il est done clair 

 que la levure n'a pas du tout besoin de fer pour se developper. Lorsqu'on introduit 

 dans une de ces plaques une petite quantite de sel de fer, p. ex. du chlorure ferrique, 

 du citrate ferrique, du sulfate ferreux ou du sel de Mohr, il se forme au bout de 

 quelques jours un pigment rouge fonce dans le champ de diffusion du fer. Si Ton a 

 recouvert la culture partiellement d'un couvre-objet, de faqon a empecher 1'acces de 

 1'air, on voit que la coloration ne s'y produit pas, meme s'il y a assez de sel de fer. Le 

 pigment rouge est done une combinaison de fer qui se forme par oxydation. 



On demontre aisement et de diverses faqons que le pigment est forme par un 

 chromogene incolore, qui produit le pigment rouge, aussi bien dans la cellule qu'au 

 dehors, en presence de sel de fer et d'air. 



On peut s'en convaincre le plus facilement en n'ajoutant au terrain de culture 

 qu'une toute petite quantite de sel de fer, p. e. 10 milligrammes de citrate ferrique a 

 100 cm 8 . Le Piilcherrimus inocule en traits sur ce substratum ne trouve pas alors 

 assez de fer dans son voisinage immediat pour fixer immediatement toute la matiere 

 chromogene formee; celle-ci a 1'occasion de diffuser en partie hors des cellules et de 

 se transformer dans le pigment rouge dans le terrain de culture meme, c. a d. a 1'ex- 

 u'rieur des cellules. On peut aussi laisser se developper des traits de Pulcherrimus 

 sur un terrain de culture exempt de fer; la levure y deverse alors sa matiere chromo- 



