Bereiding van tyrosine voor de tyrosinase 



reaktie. 



Chemisch Weekblad, i6e Jaargang 1919, biz. 1494 1495. 



Daar de prijs van tyrosine steeds zeer hoog is en deze stof in de laatste 

 jaren in den handel niet of moeilijk was te verkrijgen, schijnt de beschrij- 

 ving van een eenvoudige bereidingswijze niet overbodig. 



Vele jaren geleden maakte ik de volgende opmerking. Teneinde proeven 

 met trypsine te doen, kocht ik bij een slager een ossen-pancreas, wreef daarvan 

 een gedeelte in een mortier fijn, digereerde met lauw water en filtreerde. Het 

 filtraat bleek echter onwerkzaam te zijn. Het grootste deel van de pancreas was 

 overgebleven en werd in een warm vertrek aan de lucht bewaard. Na twee dagen 

 zag ik dat de geheele massa wit was geworden en bevond, bij mikroskopisch 

 onderzoek, tot mijn groote verwondering, dat het geheel veranderd was in een 

 kristalbrij van tyrosinenaalden. Na opnieuw te hebben gedigereerd bleek het 

 filtraat nog zeer rijk aan trypsine te zijn. Het was dus duidelijk dat de pan- 

 creasklier bij het bewaren trypsine had voortgebracht en dat deze eerst de eiwit- 

 achtige stof van dat orgaan had gepeptoniseerd en daarna de pepton (of trypton) 

 in tryosine had omgezet. Deze waarneming gaf aanleiding tot de volgende be- 

 reidingswijze. 



Voeg aan een lo-procentige oplossing van pepton siccum van den handel 

 een kleine hoeveelheid trypsinum (pancreatinum) activum der apotheken toe; 

 vul met de oplossing een stopflesch geheel en al en schud door met een weinig 

 chloroform om de rotting door anaerobe bakterien te verhinderen ; plaats in een 

 thermostaat bij 40 en schud nu en dan om. Na 10 a 14 dagen verandert de 

 pepton in een kristalbrij van tyrosine, die met tyrosinase de zoo belangrijke 

 melaninereaktie geeft en dus gewone tyrosine is. 



Het affiltreeren en uitwasschen geeft bij de groote onoplosbaarheid van de 

 tyrosine geen bezwaar; men verkrijgt omstreeks 30 a 35 /o van het pepton- 

 gewicht als tyrosine. 



Voor de uitvoering der melanine-reaktie met tyrosinase-preparaten los ik wat 

 tyrosine op in enkele droppels natriumcarbonaat, voeg de oplossing toe aan 

 gesmolten leidingswater-agar, giet het mengsel in een glasdoos en laat tot een 

 dunne plaat stollen. Hierop worden de tyrosinase-preparaten gebracht. Als zoo- 

 danig kan ik de volgende aanbevelen : 



i. Het melksap van Euphorbia L'lihyris. Dit bevat echter ook trypsine en 

 eiwit en kan dientengevolge ook zelve een weinig tyrosine voortbrengen. Een 



