175 



7. Resume e t conclusion. 



II y a deux precedes importants pour obtenir des accumulations d'organismes 

 oligonitrophiles, conduisant a des cultures de bacteries qui fixent energiquement 1'azote 

 libre de 1'atmosphere; d'abord, le precede de culture completement grossiere, ensuite, 

 le precede de culture partiellement grossiere. 



Une culture completement grossiere s'effectue comme suit: On introduit loop, 

 d'eau de conduite, contenant 2 p. de mannite et 0,05 de K-HPO*, en couche peu pro- 

 fonde dans un large rlacon d'E r 1 e n m e y e r, on infecte au moyen de terreau frais 

 et on cultive entre 23 et 28 C. Deja au troisieme jour commence tine culture de bac- 

 teries ou Chroococcum est preponderant. Apres quelques transports la plupart des im- 

 puretes ont disparu, mais il reste toujours quelques Fluorescentes, qui ne produisent 

 pas d'acide dans la solution de mannite. Si Ton inocule cette culture dans loop, d'eau 

 de conduite, 2 de glucose et 0,05 de K 2 HPO*, on obtient la combinaison Chroococ- 

 cum + Granulobacter (sous diverses formes) + Radiobacter, qui donne lieu au ren- 

 dement d'azote le plus eleve que Ton ait atteint jusqu'ici, savoir 7 mgr. d'azote fixe par 

 gr. de sucre assimile. II n'y a pas moyen de repeter les transports dans la meme so- 

 lution au glucose, par suite de la formation d'acide par les Fluorescentes, ce qui 

 entrave la croissance. 



Mais, si Ton transporte alors dans une solution a mannite, ou si Ton suit (a 

 methode de culture alternante, en employant passagerement 1'acetate de chaux 

 comme source de carbone, - - nourriture qui ne convient pas aux Granulobacter, 

 on arrive enfin, avec la mannite, a la combinaison des deux especes non sporogenes 

 Chroococcum + Radiobacter, par laquelle peuvent etre fixes, dans la solution a man- 

 nite, environ 4 mgr. d'azote par gramme de mannite assimile. Dans cette culture les 

 Granulobacter font defaut, mais on y trouve encore des Fluorescentes, ainsi qu'une 

 petite quantite tf Aero genes et Coli. 



Le procede de culture partiellement grossiere est le suivant: On prend une so- 



dam date du 30 mars et du 25 mai 1901, M. le Dr. W. Kriiger de Halle a. S., dans 

 une lettre du 6 sept. 1901, a attire notre attention sur le passage suivant d'un travail 

 qu'il avait publie dans Landwirtschaftl. Jahrb. 1900, p. 701: Hier mag zunachst noch 

 ein Versuch kundgegeben werden, der dafiir Zeugnis ablegt, dass unter denselben Ver- 

 haltnissen, unter welchen wir die Algen ziichteten (le travail de M. Kriiger traite 

 notamment la question de savoir si les algues a chlorophylle inferieures sont en etat 

 d'assimiler 1'azote libre, dont la reponse est negative) bei Organismen welchen das 

 Vermogen eigen ist, sich des freien Stickstoffs der Luft als Stickstoffquellen zu be- 

 dienen, Stikkstoffaufnahme aus der Atmosphare stattfindet. Von mehreren Versuchen 

 sei hier das Ergebnis eines derselben mit einem aus dem Boden gezuchteten Organis- 

 mus angefiihrt. Dazu wurde wieder eine Nahrlosung ohne Zusatz von Stickstoffver- 

 bindungen, die pro 100 ccm. nur 0,0003 S- Stickstoff enthielt, verwendet. . . . . Au bout 

 de 62 jours il constate dans 100 cm 3 , une augmentation de 4,6 mgr., dans 200 cm 8 . 

 6,8 mgr. et dans 300 cm 8 . 8,5 mgr. d'azote fixe. M. Kriiger continue en ces termes: 

 Es wurden also nicht unbetrachtliche Mengen von elementarem Stickstoff assimiliert 

 und die Entwicklung der Kulturen machte keineswegs den Eindruck, dass dem Or- 

 ganismen irgend ein wichtiger Nahrstoff nicht zu Gebote stand. L'organisme dont il 

 est question ici etait Chroococcum, ainsi que nous avons pu nous en assurer a 1'aide 

 d'un tube de culture que M. Kriiger nous envoya en meme temps que sa lettre; la 

 culture n'etait toutefois pas pure, mais un melange complexe de microbes. 



