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3- Examen de la decomposition de I'uree. Phenomene de l'irisation. 



Pour poursuivre regulierement la transformation de I'uree dans les liquides de 

 culture, il suffit de determiner la quantite de ce corps disparue par titrage du carbo- 

 nate d'ammoniaque forme. D'apres la formule CH*N 2 O+2H 2 O = CO 3 (A'H 4 )-, 60 g. 

 d'uree donnent naissance a 90 g. de carbonate d'ammoniaque. Si ce carbonate est dis- 

 sout, 2000 cm. 3 d'acide normal sont necessaires pour le neutraliser. Si done 100 cm. 3 

 d'un liquide nourricier a uree, primitivement neutre, exigent 100 cm. 3 d'acide normal 

 pour leur neutralisation, cela veut dire que 3 g. d'uree ont ete transformers en 4,5 g. de 

 carbonate d'ammoniaque; de sorte que la disparition de i% d'uree correspond a 33,3 

 cm. 3 d'acide normal. Pour le carbonate d'ammonium on peut admettre que i g. exige 

 environ 22 cm 3 , d'acide normal pour sa neutralisation. Le sel du commerce se trans- 

 forme pourtant a la longue, en donnant naissance a du carbonate acide (CO 3 ATH 3 ), du 

 sesquicarbonate (C 3 O 9 ./V 4 // 18 ) et du carbamate (CO 2 N 2 H). Par la 1'alcalinite se mo- 

 difie, de sorte que, du carbonate d'ammoniaque dont je me suis servi, i g. n'etait pas 

 neutralise par 22 cm 3 , mais par 15 cm 3 , d'acide normal. On doit necessairement tenir 

 compte de cette circonstance et titrer ce soi disant carbonate d'ammoniaque avant de 

 1'employer. 



Bien que dans les experiences avec des bacteries de I'uree on perde toujours beau- 

 coup de carbonate par evaporation des flacons bouches a 1'ouate, la precision des 

 estimations n'est pas par la considerablement diminuee, puisque des dizaines, meme 

 des centaines de centimetres cubes d'acide normal sont necessaires pour neutraliser 

 100 cm 3 , du liquide de culture. D'ailleurs, 1'evaporation est d'autant plus faible que 

 les solutions sont moins concentrees, de sorte que pour les urobacteries peu actives 

 les erreurs sont beaucoup moins grandes que pour les formes tres actives. 



La reaction sur la presence ou 1'absence d'uree dans du bouillon de viande s'effec- 

 tue, au laboratoire bacteriologique, d'une faqon simple, basee sur 1'emploi d'urobac- 

 teries ou d'urease. Le liquide a analyser, - - d'ordinaire un liquide nourricier con- 

 tenant de I'uree en voie de decomposition et dont on veut determiner s'il y a encore de 

 I'uree non transformee, - - est neutralise a 1'acide chlorhydrique s'il contient du car- 

 bonate d'ammonium, et, si la concentration du carbonate etait elevee, dilue avec de 

 1'eau pour abaisser la concentration du sel, qui pourrait retarder la decomposition 

 ulterieure de I'uree. On y introduit ensuite une abondante quantite d'urobacteries (de 

 preference YUrobacillus pasteurii ou YUrococcus ureae), et on 1'expose dans un bain 

 d'eau a une temperature de 45 50 C. S'il reste encore de I'uree, il se forme au bout 

 de i a 2 heures du carbonate que Ton peut titrer de nouveau. 



Pour etablir si certaines colonies de bacteries sont, oui ou non, en etat de decom- 

 poser I'uree et, dans le premier cas, determiner 1'intensite approximative de cette 

 decomposition, on arrive le plus rapidement au but en cultivant sur un milieu solide. 



Nous avons dit plus haut qu'a cet effet M. M i q u e 1 se servait de bouillon de 

 viande gelatinise a 2% d'uree, ou il reconnaissait les colonies decomposant I'uree par 

 la formation de carbonate de calcium sous forme de poudre cristalline. 



Toutefois, la sedimentation de ces cristaux ne commence qu'apres plusieurs heures 

 et ne s'effectue que tres irregulierement; elle depend des autres substances presentes 

 dans la gelatine de culture, et de plusieurs conditions accessoires incompletement con- 

 nues. II en resulte que cette methode est de longue duree et incertaine. 



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