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En tachant d'obtenir des cultures pures des organismes oligonitrophiles sur 

 substrat solide, j'ai reconnu que les bacteries saprophytes ordinaires, dont les germes 

 foisonnent dans les materiaux d'infection, ne se developpent pas, ou presque pas, dans 

 les accumulations, ce qui provient de 1'alimentation azotee insuffisante, cle sorte 

 que Ton peut qualifier ces bacteries de polynitrophiles. Certaines autres especes 

 se comportent de faqon intermediaire au point de vue de 1'alimentation azotee, ct 

 seront considerees d'un peu plus pres au 4, sous le nom de mesonitrophiles. 



C'est le moment de faire remarquer un autre point encore, par lequel se carac- 

 tc-risent les organismes oligonitrophiles aerobics. Us ne forment notamment pas de 

 spores, ce qui a pour consequence que des experiences entreprises avec du terreau 

 chauffe dans 1'eau bouillante ne conduisent pas a des cultures de Chroococcum. II en 

 cst autrement du ferment butyrique ; celui-ci forme des spores qui resistent parfaite- 

 ment a des temperatures de 90 a 100 C. Bien que la fermentation butyrique mise en 

 train par de la terre pasteurisee s'effectue plus lentement et moins bien qu'avec de 

 la terre fraiche, on constate cependant en principe les memes phenomenes, sauf pour 

 les symbiontes plus ou moins accidentels qui sont bien differents dans les deux cas 1 ). 

 Quand je traiterai les organismes mesonitrophiles, je parlerai d'une espece parti- 

 culiere et interessante de ce groupe, et qui se presente tres souvent apres la 

 pasteurisation, quoique pas toujours, comme symbionte des oligonitrophiles propre- 

 ment dits, savoir le Granulobacter sphericum. 



3. Accumulation d'Asotobacter cliroococcmit du terreau de jar din. 



J'ai obtenu de tres riches cultures de la fac,on suivante, tres simple. 

 Un liquide notirricier compose de 



Eau de conduite 100 



Mannite 2 



K 2 HPO* 0,02 



est introduit en couche peu profonde dans un ballon d ' K r 1 enm.e y e r , infectr 

 avec une grande quantite, p. ex. 0,1 a 0,2 gr., de terreau frais, et expose a une tem- 

 perature de 27 a 30 C. Par la presence de K-HPO* la reaction est faiblement 

 alcaline 2 } et il se separe peu a peu du phosphate de calcium sous forme d'une mince 

 couche superficielle, formee de petits spherites. Des combinaisons azotees autres que 

 les faibles quantites contenues dans 1'eau et la terre font ici completement defaut, 

 mais ces faibles quantites sont necessaires pour le succes de 1'experience ; sans elles 

 il ne se developpe que peu de microbes, comme nous 1'avons vu, et ce developpement 



') De nombreuses experiences nouvelles me font croire que cette derniere assertion, 

 basee sur 1'autorite de M. Winogradsky plus que sur ma propre experience, n'est 

 exacte que quand il y a beaucoup de carbonate de calcium en presence. J'ai reconnu 

 qu'en 1'absence de cette substance I'azote libre nest fixe que quand le Chroococcum 

 existe dans la masse, mats la quantite d'azote combine pent meme etre triplee quand les 

 cultures contiennent en meme temps le ferment butyrique ou un de ses congener es. Mais 

 cette question sera traitee amplement dans un travail ulterieur. 



') La reaction alcaline est avantageuse pour 1'experience. On peut aussi se servir 

 de KH*PO*, mais alors le resultat est incertain. 



