Pour le reste, dans ce cas aussi nous croyons que nous avons donne dans le 

 tableau precedent assez de details des experiences pour pouvoir nous abstenir de plus 

 amples developpements. 



6. E x p e r i e n c e s s u r la nitrification d e 1'a z o t e 1 i b r e. 



Une solution composee de 100 p. d'eau de la distribution, i de glucose et 0,05 de 

 K'-HPO* fut infectee le 23 dec. 1901 avec le 26e transport de notre culture grossiere 

 a mannite. Par comparaison avec des cultures paralleles nous avons constate que le 

 23 janv. 1902 il y etait deja fixe 70 mgr. d'azote libre par litre, en meme temps qu'il 

 s'etait forme une epais mucus de Chroocbccum, a reaction tres faiblement alcaline. 

 L'azote devait avoir ete fixe en majeure partie sous forme de protoplasme du Chroo- 

 coccum lui-meme. Le 23 janv. nous y avons introduit un peu de terreau frais, d'une 

 part pour ajouter des bacteries capables de transformer 1'albumine de Chroococcum en 

 sel d'ammonium, et en second lieu pour introduire les ferments de la nitrification. Apres 

 3 semaines nous avons distinctement pu constater la formation de nitrite et vers le 

 milieu de mars 1902 nous n'y trouvions plus de nitrite, mais seulement du nitrate 

 en grande quantite. Par voie colorimetrique, au moyen de la reaction de dipheny- 

 lamine et acide sulfurique, nous avons trouve que le filtrat du liquide contenait en tout 

 environ 250 mgr. de nitrate par litre (calcule comme KNO 3 }. Comme les 70 mgr. 

 d'azote correspondent a 500 mgr. de KNO 3 , nous voyons qu'au bout de 7 semaines la 

 moitie a peu pres de 1'azote libre assimile etait nitrifie. Et comme cet azote a du 

 etre entierement contenu dans 1'albumine de la masse bacterienne nouvellement formee, 

 surtout dans Chroococcum, nous avons ainsi une mesure approchee de la vitesse avec 

 laquelle se nitrifie 1'azote, present dans le corps de Chroococcum a 1'etat d'albumine. 



Nous avons repris ces experiences plus d'une fois et toujours avec le meme 

 resultat. 



En les effectuant, il est recommandable de ne pas se fier exclusivement a la reac- 

 tion qualitative au moyen de diphenylamine et d'acide sulfurique, mais d'operer quan- 

 titativement comme nous 1'avons decrit, et cela pour la raison suivante: 



Quand on introduit du terreau frais, sans plus, dans 1'eau de la distribution, !a 

 reaction par diphenylamine et acide sulfurique ne reussit pas au commencement, 

 meme quand on melange 5 a 10 gr. de terreau avec 50 cm 3 , d'eau. Et cependant ce 

 terreau contient des substances capables d'etre nitrifiees apres dilution avec de 1'eau 

 et par aeration, sans qu'il soit necessaire d'ajouter des sels ou d'autres substances. 

 Au bout de quelques jours la reaction a la diphenylamine -j- acide sulfurique est 

 positive, independamment de 1'azote atmospherique fixe ou non fixe. 



Mais nous avons trouve que 0,5 gr. de terreau dans 50 cm 3 , constituait la limite 

 de sensibilite de la reaction, car en employant moins de terreau encore, il n'y avait 

 plus moyen de decouvrir du nitrate ou du nitrite. Si Ton a done employe pour 1'ex- 

 perience en question plus de 50 cm 3 , d'eau et moins de 0,5 gr. de terreau pour 1'infec- 

 tion, un resultat positif de la reaction qualitative susdite prouve deja, sans aucune 

 determination quantitative, que de 1'azote atmospherique a ete nitrifie *). 



*) Notice historique. Apres la publication du travail sur 1'oligonitrophilie (voir ces 

 Archives, (2), 8, 190, 1903), dont la communication a 1'Academie des Sciences d'Amster- 



