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18. Die Urease. 



Im Jahre 1876 wies MUSCULTJS (1 u. 2) auf das Yorkommen eines 

 Enzymes in fadenziehend und ammoniakalisch gewordenen Harnen gewisser 

 Kranker hin, welches bei Abwesenheit von Kleinlebewesen den Harnstoif in 



5 Ammoniumkarbonat umzuwandeln vermoge. Er Melt dieses Enzym flir 

 eine krankhafte Ausscheidung der Harnblase. PASTEUR und JOUBERT (1) 

 bestritten diese Annahme und erklarten die von ihnen in einem ahn- 

 lichen Falle beobachtete Harnzersetzung als enzymatische Wirkung des 

 von ihnen dann als Harnstoffvergarer beschriebenen Micrococcus. 



10 Die Bereitung und Gewiniiung dieses Enzymes ist zum ersten Male 

 im Jahre 1890 durch P. MIQUEL (12) versucht worden. Er gab ihm 

 zunachst den Namen Urase, anderte diesen aber spater dann. ent- 

 sprechend einem durch BOURQUELOT gemachten Vorschlage, in den besser 

 klingenden Namen Urease urn. Er erhielt es auf die Weise, dafi er 



ishb'chst garkraftige Harnstoif bakterien in glinstig zusammengesetzter 

 Bouillon ziichtete. 



Nachfolgend angegebenes Verfahren laCt eine reclit gute Ausbeute 

 erzielen. In einem geraumigen Gefafie, enthaltend wassrige Pepton- 

 Ibsung oder noch besser eine mit Pepton versetzte Bouillon, sat man, 



2onachdem man fiir alkalische Reaktion durch Zugabe von Ammonium- 

 karbonat oder vorteilhafter 2 3 g Harnstoif pro Liter gesorgt hat, eine 

 sehr garkraftige Art von Harnstoifbakterien ein und halt dann die 

 Zucht bei 3035 C. Urn die Vermehrung der Zellen anzueifern, kann 

 man einen sehr schwachen Strom keimfreier Luft hindurchtreiben und 



2oSich zu dem Zwecke eines GefaBes mit flachem Boden bedienen. wie es 

 z. B. zur Uarstellung des Diphtherietoxines in Gebrauch ist. Nach Ab- 

 lauf einiger Tage, oft schon nach 48 Stunden, enthalt die Fliissigkeit 

 so viel Enzym, daB dadurch im Liter 40 60 g Harnstoif in der Stuude 

 zersetzt werden. Der Gehalt daran steigt bis zum Ende soweit an, daB 



so dann in der gleichen Zeitspanne 100120 g Harnstoif gespalten werden 

 kb'nnen. Man kann diese an Urease nun reiche Bouillon durch ein 

 Biskuit-(Porzellan-)Filter treiben, ohne daB sie eine nennenswerte Ein- 

 buBe an Wirkungskraft verlore, vorausgesetzt, dafi dazu mehrere Liter 

 vervvendet worden sind. 



35 Die ureasehaltige Bouillon bewahrt ihr Zersetzungsvermogen durch 

 3 4 Monate, soferne zu ihr nur eine sehr geringe Menge von Luft zu- 

 treten kann oder solche iiberhaupt durch eine Atmosphare von Leucht- 

 gas oder eines anderen unschadlichen Gases abgehalten ist. Wenn solche 

 Bouillon durch Verunreinigung mit Fremdkeimen in Zersetzung gerat, 



40 verschwindet die Urease darin binnen wenigen Tagen vollstandig. 



Die fiir die Hydrolyse durch dieses Enzym giinstigste Temperatur 

 liegt zwischen den Grenzen von 48 und 50 C. Bei der oberen eiieidet 

 es bereits eine teilweise Zersetzung; diese ist eine vollstandige binnen 

 zwei Stunden, wenn die Temperatur von 70 75 C einwirkt, und binnen 



45 einer Minute, wenn 80 " C gewiihlt worden sind. Kalte von - - 5 C schwacht 

 es in 5 6 Tagen merklich, zerstb'rt es jedoch nur langsam. Bei C 

 lialten sich Ureaselosungen sehr gut. Versuche zur Aureicherung an 

 diesem Enzym durch Ausfrieren haben kein befriedigendes Ergebnis 

 gehabt. 



50 Einige Stoffe, wie Saccharose und Glycerin, vermogen die Wirkungs- 

 kraft der Urease zu verdoppeln und zu verdreifachen , vielleicht da- 



