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man eine grofiere Anzahl von Kolbchen beimpft, so wird man fast immer 

 in einigen von ihnen den Nitratbildner rein erhalten. Urn Gewifiheit 

 dariiber zu erlangen, beimpft man Bouillon mit einigen Tropfen nitratierter 

 Fliissigkeit; die Bouillon darf sich dadurch in der Folge nicht ver- 



sandern. Die ganze Arbeit der Abscheidung des Organismus aus dem 

 Boden nimmt nicht weniger als 2 3 Monate in Anspruch, da man vor- 

 erst noch einige Ueberimpfungen (2 3) in Nitritlosung vornehmen mufi, 

 um erst dann an die Ziichtung auf Nitritagar zu schreiten. 



Die mikroskopische Untersuclmng kann auch liber die Reinheit der 



10 Kultur bis zu einem gewissen Grade AufschluB geben. Der Nitratbildner 

 ist namlich durch seine schwere, darin an das Verhalten von Sporen 

 erinnernde Farbbarkeit von den ihn begleitenden kleinen Stabchenarten 

 zu untersclieiden: wenn man also mit Gentianaviolett einige Sekunden 

 lang kalt farbt, so werden die gutgefarbten Stabchen, die man im 



loPraparate trift't, nicht dem Nitratbildner sondern irgend einer verun- 

 reinigenden Art angehb'ren; zwischen diesen wird man dann bei auf- 

 merksamer Untersuchung ganz farblose Stabchen in Menge finden, welche 

 gerade die des Nitratbildners sind. 



Fiir das Studium der Morphologic der Ze lichen dieses Or- 



2oganismus eignen sich die Zuchten auf Nitritagar am besten. Nach dem 

 Farben mit Karbolfuchsin unter Erwarmen und darauffolgendem 

 Waschen mit verdiinntem, angesauertem Alkohol. erscheinen die Zellchen 

 stabchenformig, am einen Ende oder an beiden verjiingt, unter 1 fi lang 

 und etwa 0,30,4 (.1 dick. Die Farbung ist dabei keine gleichmafiige; 



25nur der mittlere Teil der Stabchen erscheint gefarbt, die zugespitzten 

 Enden dagegen sind fast farblos (vgl. Fig. 5 auf Taf. V). Bei Anwendung 

 von LoEFFLEB'schem alkalischem Methylenblau farben sich nur die in den 

 Zellchen (meistens in derEinzahl) vorhandeneiiKornchen kraftig; der iibrige 

 Teil des Zelleibes ist so blati, dafi man mit Miihe die Kontouren der Stab- 

 so chen um die Kornchen herum sucht. Wenn man nicht stark genug farbt, 

 sieht man nur Haufchen dieser unmelsbar kleinen Kornchen, weil man 

 die Stabchen nicht untersclieiden kann. Schon nach dieser Behandlung 

 beobachtet man um die Stabchen einen farbigen Hot', welcher das Yor- 

 kommen einer Schleimhiille oder Kapsel vermuten lafit. Um 



sbdiese hervortreten zu lassen, farbt man durch einige Sekunden mit 

 Gentianaviolett unter Erwarmen, wascht aber nicht mit Wasser. sondern 

 mit 2-proz. Kochsalzlosung und untersucht in einer solchen von 10 Pro/. 

 Gehalt. Die Zellchen erscheinen dann von violetten Hufen umgeben, 

 die nach aufien sich verlieren. nach innen dagegen farblose Ivorperchen 



4oscharf umgrenzen. Diese letzteren erscheinen dann nicht so klein. etwa 

 1,21,5 (.1 lang und 0,6 0,7 /n dick. Oifenbar schlagt sich bei dieser 

 Behandlungsweise der Farbstoff auf den aufiersten verquollenen Teilen 

 der Hiille nieder; die Hiille selbst aber mit der eingeschlossenen Zelle 

 bleibt ungefarbt. Durch halbstlindiges Erwarmen in Gentianaviolett- 



45L6sung gelingt es, die Korperchen auszufarben und nun innerhalb der 

 farblos gebliebenen Kapsel die wdnzigen, schwach gefarbten Stabchen 

 zu untersclieiden. 



Der Nitratbildner scheint keine Sch warmer zu bilden. We- 

 nigstens ist es bis jetzt nicht gelungen, solche mit Sicherheit zu be- 



f,o obachten. 



