Quantitative Analyse der vier Chloroplastenfarbstoffe. 09 



3. Bestimmung der vier Blattfarbstoffe 1 ). 



Extraktion. 



Fur alle Bestimmungen haben wir die Blatter selbst gesammelt, 

 und zwar unter Beriicksichtigung der besonderen Wachstums- 

 bedingungen: Jahres- und Tageszeit, Witterung, Sonnen- oder 

 Schattenseite, Stellung an der Pflanze. Fur Doppelversuche hat 

 immer dieselbe Blatterprobe gedient, ofters wurden die Blatter da- 

 fur halbiert. 



Willstatter und Isler haben die Mehrzahl ihrer Versuche 

 mit getrockneten Blattern ausgefuhrt, namlich mit Proben von 

 10 g, entsprechend einem Chlorophyllgehalt von 0,05 0,1 g. Die 

 frisch gepfliickten Blatter wurden von Stielen und Hauptrippen 

 abgetrennt und in Mengen von 50 100 g im Vakuum iiber Schwefel- 

 saure getrocknet. Die sprode gewordenen Blatter zerkleinerte man 

 mit einer Schneidemaschine und verwandelte sie mit einer Uni- 

 versalmiihle in grobes Pulver; endlich wurde dieses in einer Porzel- 

 lankugelmiihle staubfein gemahlen. 



Die Extraktion ist in der angefuhrten Arbeit in ganz kleinen, 

 auf Saugflaschen aufgesetzten Perkolatoren mit Sprit ausgefuhrt 

 worden. Einfacher und sicherer ist das neue Nutschenverfahren 

 mit wasserhaltigem Losungsmittel. 10 g Blattmehl werden auf 

 einer Trichternutsche anfangs mit 85-, dann mit 90 prozentigem 

 Aceton etwa in i Stunde erschopfend ausgezogen und geben 200 

 bis 300 ccm Extrakt. 



Wir haben in der hier mitgeteilten neuen Versuchsreihe die 

 Blatter stets in frischem Zustand extrahiert. Sie sind sofort nach 

 dem Pfliicken in Parallelversuchen verarbeitet und in alien Fallen 

 zugleich fur die Trockenbestimmung abgewogen worden, namlich 

 40 g, die im Vakuumexsiccator iiber Schwefelsaure nach 24 bis 

 48 Stunden gewichtskonstant waren. 



Vor der Extraktion behandeln wir die Blatter mit wasser- 

 haltigem Aceton, das sie weich macht und aus ihnen farblose Ex- 

 traktstoffe, z. B. Pflanzensauren beseitigt, wahrend es vom Chloro- 

 phyll keine Spur aufnimmt. Storende Enzymreaktionen, z. B. 



l ) Unveroffentlicht. 



7* 



