Quantitative Analyse der vier Chloroplastenfarbstoffe. 0,7 



0,050 g trockene und etwas gepulverte Substanz iibergieBen 

 wir mil 5 6 ccm siedender 35 prozentiger methylalkoholischer 

 Kalilauge; das Reagensglas war vorher auf etwa 60 angewarmt 

 und die Lauge wird sofort wieder zum Kochen gebracht und ohne 

 Wegdampfen von Methylalkohol in schwachem Sieden gehalten, 

 bis das Chlorophyll klar gelost ist. Dann erhitzt man noch x /4 Minute, 

 kiihlt ab und spiilt die Lauge mil Wasser in einen Y 2 1 Scheide- 

 trichter. Wir sauern nun mit 20 prozentiger Salzsaure ziemlich 

 stark an, um etwa durch Aufnahme von Zink aus dem Glase ent- 

 standene Komplexverbindung zu zersetzen. Mit x /4 1 Ather wird 

 kraftig durchgeschiittelt und die Saure mit Ammoniak abgestumpft, 

 bis die wasserige Schicht nur noch sehr schwach blau ist. Die letzten 

 Spuren von Chlorin lassen sich erst mit weiteren 50 ccm Ather voll- 

 standig extrahieren. Die beiden atherischen Ausziige werden ver- 

 einigt und zur Entfernung des Methylalkohols, der die Farb- 

 nuance der salzsauren Chlorinausziige beeinflussen wiirde, zweimal 

 mit 200 ccm Wasser gewaschen. 



Der Ather wird mit 3 prozentiger Salzsaure dreimal extrahiert, 

 und zwar mit je 120 ccm, dann zweimal mit je 50 ccm 5 prozentiger 

 Saure. Die zwei letzten Ausziige miissen fur sich nochmals frak- 

 tioniert werden. Wir fuhren daraus die Basen wieder in 30 50 ccm 

 Ather iiber und ziehen aufs neue Chlorin zwei- bis dreimal mit 

 3 prozentiger Saure aus. Der iibrigbleibende schwach rot gefarbte 

 Ather kommt zur Hauptlosung von Phytorhodin. Nun extrahiert 

 man dieses mit 12 prozentiger Salzsaure, z. B. dreimal mit 120 ccm. 

 Der iibrigbleibende Ather ist je nach der Beschaffenheit des Pra- 

 parates farblos oder gelb; 2Oprozentige Salzsaure darf ihr keinen 

 Farbstoff oder nur eine Spur entziehen. 



Die a-Komponente liegt nun in Form des Chlorins e in ather- 

 gesattigter 3 prozentiger Salzsaure, b als Rhodin g in 12 prozentiger 

 Saure vor und die beiden Ausziige werden mit athergesattigter 

 Salzsaure der entsprechenden Konzentration auf 500 ccm gebracht. 



Vergleichslosungen. Mittels der Spaltungsprobe wird das 

 Komponentenverhaltnis in dem zu untersuchenden Praparat ge- 

 schatzt; bei Reinchlorophyll ist es gewohnlich 2 l / z . In diesemFalle 

 mischen wir 0,0356 g Chlorophyll a und 0,0144 g Chlorophyll b 



Willstatter-Stoll, Chlorophyll. 7 



