180 R- Willstatter und A. Stoll, Untersuchungen uber Chlorophyll. 



Nach der Reaktion fiihren wir Proben des Farbstoffes, z. B. 

 0,01 g, oder bei Versuchen in kleinem MaBstab die ganze Menge in 

 Ather uber (100 ccm) und extrahieren mit n/ 50 -KOH unter Zusatz 

 von ein paar Kubikzentimeter Holzgeist den sauren Anteil, nam- 

 lich etwa dreimal mit 30 50 ccm. 1st viel Chlorophyllid gebildet, 

 so scheidet sich sein Kaliumsalz oft in Form einer Emulsion an 

 der Trennungsschicht von Lauge und Ather aus ; es wird mit mehr 

 verdiinnter Lauge in Losung gebracht. Die vereinigten alkali- 

 schen Auszuge bringen wir mit Methylalkohol auf 200 ccm ; da- 

 durch laBt es sich verhiiten, daB die Losung rasch miBfarbig wird. 

 Dann verseift man das im Ather zuriickgebliebene Chlorophyll 

 durch Zusatz von 5 ccm methylalkoholischem Kali und verdiinnt 

 nach dem Wiederkehren der griinen Farbe gleichfalls mit 100 ccm 

 Wasser und mit Holzgeist auf 200 ccm. Die beiden Losungen 

 werden im Colorimeter verglichen, dabei betragen die Fehler 



2-3%. 



In zwei Beispielen mit Heracleum unter gleichen Bedingungen 

 fanden wir so in guter XJbereinstimmung 70 und 71% hydrolysier- 

 tes Chlorophyll. 



Um nach dieser Methode die Enzymwirkung eines Pflanzen- 

 materials zu untersuchen, sind folgende Bedingungen geeignet. 



Die Hydrolyse wird in Aceton von 66 Volumprozent ausgefuhrt. 

 Das Mehl der zur Gewichtskonstanz getrockneten Blatter (i g) 

 schiitteln wir zunachst 5 Minuten lang mit 4 ccm reinem Aceton ; 

 diese Zeit geniigt zum guten Extrahieren, und der Extrakt enthalt 

 nur unverandertes Chlorophyll. Dann werden 2 ccm Wasser unter 

 Umschutteln hinzugefiigt, wobei das Mehl aufquillt und sich dunkler 

 farbt. Diese Masse bewegen wir im Thermostaten von 20gewohn- 

 lich i Stunde lang. Dann saugt man auf der Nutsche die Chlorophyll- 

 losung ab und wascht mit 66 prozentigem Aceton griindlich nach. 



Bei der Untersuchung frischer Blatter bestimmen wir den 

 Wassergehalt und wenden so viel Aceton an, daB die Losung 66- 

 prozentig wird: z. B. gaben 5 g Blatter von Heracleum i g Trocken- 

 substanz; sie wurden mit Quarzsand zerrieben und mit 8 ccm 

 Aceton versetzt. Die Losungen werden immer verdiinnter als bei 

 der Verarbeitung getrockneter Pflanzen. 



