Die praparat. Verwendungen der Chlorophyllase : Die Chlorophyllide. 1 07 



Ather zuriick, aber er verursacht beim Ausschiitteln mil Wasser 

 keine lastigen Emulsionen mehr und wird dabei nahezu entfernt. 

 Die Losung ist noch fiinfmal mil je 20 1 Wasser durchzuschiitteln 

 und ihr Volumen dabei durch Nachfiillen von Ather unvermindert 

 zu erhalten. SchlieBlich engt man die atherische Losung im Wasser- 

 bade auf 3 1 ein. Die Hauptmenge krystallisiert dann beim Stehen 

 in einigen Stunden aus; sie wird auf dem Filter mit Ather ge- 

 waschen zur Befreiung von Mutterlauge und gelben Begleitern, bis 

 die Waschfliissigkeit rein hellgriin ablauft. Das Filtrat liefert bei 

 starkerem Einengen weitere Krystallisationen von wenig geringerer 

 Reinheit. 



Die Ausbeute betrug 17 g, wovon 13 als erste Krystallisation 

 isoliert waren. Beim Verarbeiten kleinerer Mengen ist dieser Be- 

 trag leicht zu iibertreffen. 



Eine Verbesserung dieses Verfahrens von Willstatter und 

 Utzinger 1 ) zieht die Nutzanwendung aus der Erkenntnis des 

 enzymatischen Prozesses und erzielt die Vervollstandigung der 

 Alkoholyse, auch wird das umstandliche Reinigungsverfahren mit 

 Talk vereinfacht. Zwei Punkte der Vorschrift werden als wesent- 

 lich erkannt: 



1. Geniigend lange Einwirkung des Blattmehls auf den Extrakt, 



2. Zusatz von Wasser behufs Begiinstigung der Enzymreaktion. 



2 kg gemahlene Blatter einer chlorophyllasereichen Pflanze wer- 

 den mit 4 1 Sprit angesetzt. Nach einigen Stunden tropft man unter 

 Umschwenken 400 ccm Wasser zu und laBt dann unter haufigem 

 Umschiitteln die Alkoholyse fortdauern. Ihren Gang kontrolliert 

 die Reagensglasprobe durch Uberfuhren des Chlorophylls in Petrol- 

 ather; hieraus scheidet sich der Farbstoff quantitativ aus, wenn 

 die Abspaltung des Phytols vollstandig geworden ist. Dies kann 

 noch am gleichen Tage und wird jedenfalls bis zum nachsten 

 Morgen eingetreten sein. 



Der Farbstoff wird aus der abgesaugten alkoholischen Losung 

 in Ather ubergefiihrt und der Alkohol in der Hauptmenge heraus- 

 gewaschen. Man darf dabei nicht stark schiitteln, weil sonst 



*) Ann. d. Chem. 382, 142 [1911]. 



