ZU HEMOGLOBINE. 



débarrassés par centrifugalion des eaux de lavage. On les redissout dans un minimunî 

 d'eau distillée à 40" et l'on procède à une nouvelle cristallisation. Finalement, les cris- 

 taux sont recueillis sur des plaques poreuses de cellulose et séchés. 



Procédé de Scliulz (6). — Schulz applique à l'hémoglobine la méthode générale de Hof- 

 MEisTER pour l'obtention dalbuminoïdes cristallisés. Au liquide rouge obtenu après la des- 

 truction globulaire, il ajoute égal volume de la solution saturée de sulfate ammonique. 

 Ce mélange se fait à la température de 0°. On filtre pour se débarrasser d'un préci- 

 pité de globuline et on laisse cristalliser à la température ordinaire. On purifie par 

 recristallisation par la même méthode. Les cristaux seraient exempts de matière 

 organique étrangère et de sels minéraux, mais imprégnés de sulfate ammonique. 



Procédé de Frey (5) et d'Arthus (7). — Ces auteurs conseillent de dialyser le sang ou la 

 solution d'hémoglobine dans un milieu d'alcool dilué. Arthus procède comme suit : Les 

 globules lavés sont additionnés de deux fois leur volume d'eau. La solution est intro- 

 duite dans un boyau de parchemin, plongé dans une masse d'alcool à 20-25 p. 100 équi- 

 valant à 9 fois le volume des globules. Bientôt se déposent dans le boyau de nombreux 

 cristaux d'hémoglobine. 



Formes cristallines de roxyhémoglobine. — La forme des cristaux d'oxyhémo- 

 globine varie considérablement d'une espèce animale à l'autre. 



Chez le rat, ils affectent la forme d'octaèdres ou de tétraèdres; chez le cobaye, ils 

 sont uniformément tétraédriques avec troncatures sur les angles et les arêtes. L'oxyhé- 

 moglobine de l'écureuil cristallise en tables hexagonales, celle du cheval en prismes 

 rhombiques, terminés par des faces planes ou, surtout après traitement par l'alcool à 

 25 p. 100, en prismes terminés par des pyramides. Cette dernière forme s'observe aussi 

 chez le chien. L'oxyhémoglobine de l'oie donne des cristaux tabulaires rhombiques. 

 Récemment on est revenu à la détermination de la provenance du sang par l'examen 

 des cristaux d'oxyhémoglobine en médecine légale (Moser, 1901 ; Friboes, 1903). 



Ces différences de forme ont peu d'importance : suivant les conditions de cristallisa- 

 tion, la même solution fournira des prismes ou des tables. Ce qui est plus intéressant, 

 c'est que des 47 oxyhémoglobines de vertébrés étudiées à ce point de vue, seulement 

 deux (écureuil et hamster) cristallisent dans le système hexagonal, tandis que toutes les 

 autres appartiennent au système rhombique, y compris celle de cobaye (voiN Lang) que 

 l'on avait primitivement rattachée au système cubique. 



En ce qui concerne l'oxyhémoglobine de l'écureuil, Halliburton a fait l'observation 

 intéressante qu'après plusieurs recristallisations, elle abandonne la forme de tables 

 hexagonales pour se convertir en un mélange de prismes et de tétraèdres du système 

 rhombique. 



Faut-il admettre avec Rolleït que l'oxyhémoglobine est dimorphe? Ou convient-il, 

 comme Halliburton le propose, d'attendre avant d'accepter cette conclusion, que la 

 preuve soit faite de l'identité chimique des deux genres de cristaux? L'auteur anglais 

 fait remarquer avec raison que les différentes formes cristallines pourraient correspon- 

 dre à des degrés d'hydratation différents, à des combinaisons multiples de l'oxyhémo- 

 globine avec de l'eau de cristallisation. 



D'autre part, il ne faut jamais perdre de vue, quand on obtient des mélanges de 

 diverses formes cristallines, que l'hémoglobine réduite, quoique plus soluhle, est cepen- 

 dant aussi susceptible de fournir des cristaux. Chez le cheval, l'hémoglobine réduite 

 fournit des tables hexagonales; l'oxyhémoglobine, des prismes rhombiques. Hûfner (8) a 

 constaté que, lorsqu'on ne prend pas, lors de la préparation des cristaux d'oxyhémoglo- 

 bine de cet animal, des précautions spéciales pour assurer l'oxygénisation complète du 

 liquide, on obtient un mélange de tables hexagonales (hémoglobine réduite) et de pris- 

 mes rhombiques (oxyhémoglobine) [Confirmé par Uhlik (9)]. 



Les cristaux d'oxyhémoglobine que l'on peut obtenir sont habituellement microsco- 

 piques. Cependant ils sont quelquefois beaucoup mieux développés et Gschleiden en a 

 mentionné un qui avait une longueur de 3,5 centimètres. 



La cristallisation des alhuminoïdes semblait devoir résoudre la question si difficile 

 de l'obtention de substances protéiques pures. Bien qu'elle surpasse de beaucoup 

 toutes les autres méthodes employées, il semble cependant, du moins en ce qui con- 

 cerne l'hémoglobine, qu'elle n'atteigne pas la perfection. C'est ainsi que Gschleiden avait 



