3/i4 HÉMOGLOBINE. 



Les auteurs français disent avoir obtenu la reconstitution en solution alcaline de la 

 molécule de méthémoglobiue aux dépens d'hématine et de l'acidalbumine provenant 

 du clivage de l'oxyhémoglobine. Leurs résultats ont été mis en doute par Neincki et 

 Zaleski. 



Recherche deroxyhémoglobine. — Pour caractériser dans un liquide la présence 

 de l'hémoglobine, c'est aux propriétés spectroscopiques de cette substance qu'il faudra 

 s'adresser de préférence. 



Pour séparer les hémoglobines oxygénée et réduite d'autres pigments dérivés qui- 

 peuvent leur être mélangés (méthèmoglobine, hématine, hématoporphyrine),on procède 

 liabituellemeiit à la précipitation de ces derniers par l'acétate de plomb (éviter un excès) 

 avec filtration rapide consécutive. Ce traitement entraînera à l'occasion d'autres sub- 

 stances colorantes qui pourraient gêner l'observation spectroscopique. 



La transformalion du spectre de l'oxybt'moglobine en hémoglobine réduite ou exï< 

 hémoglobine oxycarhonée, la stabilité de cette dernière vis-à-vis des agents réducteurs,. 

 l'obtention d'hémochromogène ou d'hémochromogène oxycarboné par l'action de fortes 

 concentrations alcalines sur les hémoglobines réduite ou oxycarhonée, l'action des 

 acides forts qui produisent de l'hématoporphyrine sont des preuves très caractéristiques 

 et très certaines de l'existence de l'hémoglobine dans les solutions qui les présentent. 



Méthodes de dosage de l'oxyhémoglobine. — La recherche et le dosage de 

 l'oxyliémoglobine ou de ses dérivés caractéristiques sont fondés sur les propriétés chi- 

 miques et physiques de ces substances. L'étude des divers procédés qualitatifs trouvera 

 mieux sa place au chapitre traitant de la recherche médico-légale du sang. Seules les 

 méthodes de dosage quantitatif de l'hémoglobine seront exposées ici. 



Parmi les méthodes chimiques, les plus importantes sont : 



1° Le dosage du fér. — On calcine l'hémoglobine sèche, ou le sang desséché. Les 

 cendres sont reprises par l'acide chlorhydrique, réduites par le zinc et titrées par une 

 solution de permanganate. En multipliant le chiffre exprimant le poids de fer par le 



coefficient , on obtient la quantité d'oxyhémoglobine. 



Cette multiplication par un facteur aussi considérable (300) est un sérieux inconvé- 

 nient de la méthode, qui exige d'ailleurs, pour être exacte, des quantités notables de 

 substance. Elle a été appropriée récemment aux besoins de la clinique par Jolles (59). 

 (Voir au sujet de cette méthode Hladik (60).) 



2" Dosage de l'hématine : Brozeit (61) a proposé de peser l'hématine obtenue par 

 décomposition de l'hémoglobine par l'acide chlorhydrique dilué. Le liquide est addi- 

 tionné d'acide chlorhydrique et d'éther. 



On agite vigoureusement pendant quelques instants et on introduit goutte à goutte de 

 l'alcool dans le mélange, jusqu'à ce qu'il se sépare en deux couches, l'une supérieure, 

 éthérée, colorée en brun par l'hématine; l'autre inférieure, incolore ou jaune clair. 



La solution éthérée, agitée avec une solution diluée d'ammoniaque, lui abandonne 

 l'hématine, qui est pesée après évaporation. 



L'auteur ne donne pas de preuves suffisantes de la pureté de ce produit, et l'extrac- 

 tion par l'éther n'est pas complète (Rajewsky) (62). 



QuiNQUAUD a proposé le procédé suivant de décolorimétrie. L'eau de chlore détruit 

 l'hémoglobine en la faisant passer par le jaune, le jaune-vert jusqu'au vert-gris. Pour 

 amener i gramme d'oxyhémoglobine à cette teinte, il faut une quantité donnée d'une 

 solution titrée d'eau de chlore. D'où la possibilité de déterminer la quantité d'oxyhé- 

 moglobine se trouvant dans un liquide. La méthode est inexacte à ditférents titres et 

 non recommandable. 



Dosage de l'oxygène ou de l'oxyde de carbone absorbé. — a) Méthodes physiques. — 

 Comme il a été dit plus haut, ce dosage peut se faire de diverses façons. On peut 

 extraire du sang l'oxygène qu'il contient, après agitation à l'air prolongée pendant 

 quinze minutes et centrifugation pour se débarrasser de l'écume et des bulles de gaz, 

 ou mesurer la quantité d'oxygène enlevée par la solution, après réduction complète 

 de celle-ci, à une atmosphère de volume et de composition déterminés, en tenant 

 compte de la fraction gazeuse simplement dissoute. On peut enfin déterminer, comme 

 le fait Grkhant, la quantité d'oxygène que le sang abandonne sous l'action d'un excès 



